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M. USCOLA et al. Efectividad de la fertilización foliar nitrogenada como herramienta para incrementar<br />
la concentración de nitrógeno en brinzales de Pinus halepensis Mill. y Quercus ilex L.<br />
en coníferas boreales. Aunque los valores<br />
de concentración de N testadas en estudios<br />
de deposición son más bajas que las<br />
empleada en fertilización foliar<br />
(ADRIAENSSENS et al., 2010). Los<br />
estudios sobre fertilización foliar en<br />
especies forestales mediterráneas son muy<br />
escasos, existiendo alguna experiencia con<br />
el olivo (ver Klein & Weinbaum 1985).<br />
En este estudio se compara la eficacia,<br />
medida como la absorción de N y el<br />
incremento de la concentración de N en la<br />
planta, así como la eficiencia de la<br />
fertilización foliar de cuatro fuentes de N:<br />
urea, glicina, NH4 + y NO3 - , en dos especies:<br />
Pinus halepensis Mill. (pino carrasco) y<br />
Quercus ilex L. ssp. ballota (Desf) Samp.<br />
(encina). Ambas especies son ampliamente<br />
cultivadas en los viveros forestales<br />
españoles ya que son muy utilizadas en<br />
reforestación y son especies de estrategias<br />
ecológicas y atributos funcionales muy<br />
contrastados.<br />
MATERIAL Y MÉTODOS<br />
Material vegetal, diseño experimental y<br />
marcaje con 15 N y 13 C.<br />
Los contenedores individualizados de<br />
brinzales de un año se sellaron con plástico<br />
para evitar la posible contaminación del<br />
sustrato. Las partes aéreas se fumigaron con<br />
soluciones 40mM de N de cuatro fuentes de<br />
N: amonio (NH4 + ), nitrato (NO3 - ), urea y<br />
glicina. Se prepararon dos soluciones por<br />
cada fuente de N con agua desioinizada. En<br />
la primera solución el 15 N estaba en<br />
abundancia natural (soluciones no<br />
marcadas), mientras que la segunda, estaba<br />
enriquecida en 15 N (soluciones marcadas).<br />
En el caso del NH4 + y NO3 - se utilizó<br />
sulfato amónico- 15 N y nitrato- 15 N potásico<br />
con una abundancia de 15 N del 60 átomo%,<br />
mientras en urea (SIGMA Aldrich Co,<br />
Milwaukee, USA) y en glicina fue del 98<br />
átomo% (Cambridge Isotope Laboratories,<br />
Andover, USA).<br />
Por cada especie y fuente de N se<br />
usaron cuatro y doce plantas para las<br />
122<br />
soluciones no marcadas (plantas no<br />
marcadas) y marcadas (plantas marcadas),<br />
respectivamente. La fumigación se realizó<br />
tres veces al día durante dos días. Antes de<br />
la fumigación se cosecharon cuatro plantas<br />
de cada especie (plantas control).<br />
Cuantificación de la cantidad de solución<br />
fertilizante aplicada.<br />
Durante la fumigación se colocó un<br />
papel de filtro rodeando la planta y su base.<br />
El volumen de solución aplicada (Va), se<br />
calculó como la diferencia de peso del<br />
fumigador antes (Pif) y después de cada<br />
fumigación (Pff). El volumen de la solución<br />
aplicada pero no retenida en la parte aérea<br />
(Vnr) se midió como la diferencia entre el<br />
peso del papel filtro después (Pfp) y antes de<br />
cada fumigación (Pip). El volumen de la<br />
solución retenida por la parte aérea de la<br />
planta (Vr) se calculó según la siguiente<br />
ecuación:<br />
V V V<br />
P P P P (ml) [1]<br />
r<br />
a<br />
nr<br />
<br />
if<br />
ff<br />
Procesado de plantas y análisis isotópico.<br />
Las partes aéreas se separaron de las<br />
raíces cortando por el punto de sellado con<br />
el plástico. Los cepellones se congelaron<br />
hasta su procesado. En las partes aéreas se<br />
midió la transpiración residual (TR) como<br />
un estimador de la permeabilidad de la<br />
cutícula, siguiendo la metodología descrita<br />
en VILLAR-SALVADOR et al. (2004). A<br />
continuación, la superficie foliar de cada<br />
planta se midió con una analizador de<br />
imágenes (DIAS, Delta-T Devices LTD,<br />
Cambridge, UK). Los cepellones, tras<br />
descongelarse, se lavaron con agua de grifo<br />
para eliminar el sustrato. Posteriormente,<br />
tanto las partes aéreas como las raíces se<br />
lavaron con agua destilada, se secaron<br />
durante 48 h a 60 ºC y se determinó su<br />
masa. Ambos tejidos fueron molidos por<br />
separado en un molino de bolas (PM100,<br />
Retsch, Haan, Germany) y se encapsularon<br />
para analizar la concentración de N y la<br />
abundancia isotópica de 15 N (CF-IRMS<br />
Isochrom Micromass, Inglaterra).<br />
fp<br />
ip