UNIVERSIDAD DE VALLADOLID - Quantalab

oscuridad y a una temperatura de 4 o 5ºC, evitando su degradación a causa de la luz
o el calor.
Transcurrido ese tiempo se filtró el extracto resultante y 3 ml fueron transferidos
a una cubeta de cuarzo o vidrio (ya que la acetona afecta al material plástico) para
medir su absorbancia en el espectrofotómetro (figura 26) a dos longitudes de onda
diferentes: 646 y 663 nm.
Fig.26- Espectrofotómetro donde se realizó la determinación de la clorofila.
Se calculó el error en el volumen final de la disolución de clorofila en acetona, de
esta manera se pudo comprobar que el volumen resultante del proceso de extracción
de clorofila era menor que el valor teórico (12 ml). El error total estimado fue del
6.93%.
Según cita Alan R. Wellburn, la precisión de las ecuaciones para determinar
concentraciones de Ca+b depende del disolvente utilizado y de la resolución del
espectrofotómetro utilizado. Así, para un disolvente de acetona al 80% y un rango de
resolución de 1 a 4 nm (siendo para este estudio de 2 nm) se utilizan las siguientes
ecuaciones:
Ca = 12.21 A663 – 2.81 A646
Cb = 20.13 A646– 5.03 A663
85