Præimplantationsdiagnostik - Sundhedsstyrelsen

specifikke allel. ESHRE PGD konsortiet arbejder på at lave retningslinier
for, hvorledes den største diagnosesikkerhed opnås.
Som omtalt tidligere er der kun en kopi af genomet til rådighed til diagnosen,
hvilket for eksempel betyder, at diagnosen ikke kan gentages ved tvivl
om analysesvaret. Derfor arbejdes der til stadighed på at opformere det
genomiske DNA (Whole Genome Amplification, WGA) (Wells et al.,
1999) fra én celle til mange kopier, således at det vil være muligt at foretage
en ny analyse. En anden fordel ved en komplet opformering af genomet
er, at der kan foretages separate PCR analyser for sygdomsgenet og
den informative markør, hvilket betyder optimale reaktionsbetingelser for
begge PCR reaktioner. Ved multiplex PCR, som anvendes i dag, skal
begge PCR reaktioner kunne foregå ved samme reaktionsbetingelser. På
længere sigt kunne denne metode anvendes ved polygene sygdomme, hvor
flere arveanlæg er involveret i sygdommen.
WGA kunne også anvendes i forbindelse med DNA chip teknologien. En
DNA chip er en lille plade, hvorpå der er påsat forskellige syntetisk fremstillede
genvarianter. Ved at påsætte DNA vil de genvarianter, der findes i
DNA prøven, binde sig til de tilsvarende syntetiske DNA stykker på pladen.
Med en scanner aflæses herefter hvilke varianter, der er til stede i
DNA prøven. DNA fra en blastomer opformeret med WGA kunne anvendes
til dette, og det kunne aflæses om embryonet var sygt, raskt eller
bærer. Chip teknologien vil kunne anvendes til at analysere et meget stort
antal gener samtidigt, i princippet alle vore gener. WGA teknikken er
imidlertid problematisk på nuværende tidspunkt, da det er vanskeligt at få
en jævn opformering og måske også en total opformering af DNA fra én
kopi af genomet. Dette skyldes, at ikke alle områder på kromatinet er lige
tilgængelige for de PCR primere, der anvendes til opformeringen, så man
får det der svarer til ADO eller PA. Disse tekniske vanskeligheder vil
måske forhindre, at WGA produkter kan anvendes i forbindelse med PGD
i stedet for multiplex PCR og i forbindelse med Chip teknologien.
Indenfor analysen af kromosomfejl pågår der intensiv forskning på forskellige
fronter. Komparativ genomisk hybridisering (CGH) (Kallioniemi
et al., 1992., Wells et al., 1999) er en teknik, hvorved ubalance i genomet
kan observeres. Det kan være en kromosomantalsfejl eller en ubalanceret
translokation. Ved CGH mærkes det DNA, der skal testes med et fluorescerende
farvestof (grønt) og blandes med et normalt kontrol DNA mærket
med et andet fluorescerende farvestof (rødt). Der foretages en FISH analyse
på normale metafaser. Hvis test DNA’et er normalt, vil der ses en
blandingsfarve (ratio 1:1). Hvis der er en ubalance (for eksempel et ekstra
kromosom(del)), vil denne ratio forskubbes, og en computer analyse vil
vise, hvilken kromosomfejl, der er i det testede DNA. Da en kopi af genomet
ikke er nok til denne analyse, skal blastomerens DNA opformeres
først ved WGA. Til denne analyse er det ikke væsentligt, om små områder
71