Ataxie mit okulomotorischer Apraxie Typ 2: Charakterisierung des ...

Materialien 8
Standard-Agarose
Starlab
XGal
Fermentas
Xylencyanol
Serva
3.1.2 Stammlösungen und Puffer
Tabelle 1: Puffer für die Agarose- und Polyacrylamid-Gelektrophorese
3xFicoll-Ladepuffer
150 µM Bromphenolblau; 190 µM Xylencyanol; 7,5 µM (w/v)
Ficoll 400
12,6 mM EDTA; 445 mM Tris; 445 mM Borsäure
0,1 % Bromphenolblau; 0,1 % Xylencyanol; 25% Glycerin;
0,01M EDTA
Tabelle 2: Stammlösungen für die Bakterienkultur
Stammlösungen
LB-Medium
5xTBE-Puffer (Tris-Borat-
EDTA-Puffer, pH 8,3)
10x-Glycerin-Ladepuffer
+ EDTA
LB/Amp/XGal-
Agarplatten
Zusammensetzung
10 g/l Tryptone Peptone; 5 g/l Bacto Yeast Extract; 10 g/l NaCl
10 g/l Tryptone Peptone; 5 g/l Bacto Yeast Extract; 10 g/l NaCl; 8
g/l Agar; Ampicillin (Endkonzentration: 0,1 mg/ml); XGal
(Endkonzentration: 0,08 mg/ml);
Tabelle 3: Puffer für die Plasmidpräparation (Mini-Präparation)
Puffer
Zusammensetzung
Puffer 1
10 mM EDTA; 50 mM Tris-HCl; 100 µg/ml RNase A
Puffer 2
0,2 M NaOH; 1% SDS
Puffer 3
3 M Kaliumacetat, pH 5,5 (einstellen mit Essigsäure)
3.1.3 Kits
Big Dye Terminator v1.1 Cycle Sequencing Kit
Expand High Fidelity PCR System
GC-RICH PCR System
OneStep RT-PCR Kit
PAXgene Blood RNA-Kit
pGEM T Easy Vektor System I
Perfectprep Gel Cleanup Kit
SALSA MLPA KIT P316-B1
SYBR-Green I core reagent Kit
Applied Biosystems
Roche
Roche
Qiagen
PreAnalytiX
Promega
Eppendorf
MRC-Holland
Applied Biosystems