Synthèse de composés organométalliques et évaluation de leurs activités biologiques....

2.3.3. Estimation de l’effet antimicrobien
2.3.3.1. Détermination des zones d’inhibition
Essais biologiques
A l’aide de cônes jaunes stériles, des puits sont creusés dans une boite de Pétri préalablement
coulée par du milieu Plate Count Agar (PCA) et inoculée en surface par une culture jeune
d’Agrobacterium tuméfaciens (10 6 UFC/ml). (Tagg, J. R. et McGiven, A. R., 1971).
Les puits sont par la suite remplis par 50 µl des différentes suspensions de produits à tester
(1 mg/ml), puis incubés 24 heures à la température de 37°C.
La même technique a été utilisé pour la détection de l’effet inhibiteur sur le champignon
Fusarium oxysporium, qui a été cependant inoculés au centre de la boite de Pétri et incubé
pendant une semaine à la température de 25°C pour la détection d’une inhibition à la
périphérie des puits.
2.3.3.2. Détermination des CMI et CMB
2.3.3.2.1. Souches microbiennes testées
La concentration minimale inhibitrice (CMI) et la concentration minimale bactéricide (CMB)
ont été mesurées sur les souches microbiennes illustrées sur le tableau suivant :
Tableau 17 : Souches microbiennes utilisées pour la détermination de la CMI et de la CMB
Souches Référence Description
Pathogènes pour les végétaux
Pseudomonas savastanoi CFBP 5514 Bacille à Gram –
Agrobacterium tumefaciens CFBP 1903 Bacille à Gram –
Fusarium Solani Isolée localement Champignon
Pathogènes pour l’homme
Pseudomonas aeruginosa ATCC 15442 Bacille à Gram –
Staphylococcus aureus ATCC 9144 Coques à Gram +
Candida albicans ATCC 10231 Levure
U.P.M.C./U.S. 114
2010