Synthèse de composés organométalliques et évaluation de leurs activités biologiques....

Essais biologiques
Une fois les dilutions des produits à tester sont effectuées, on introduit dans chaque tube 1 ml
de l’inoculum de la souche à tester préalablement préparé.
Un témoin négatif (tube non ensemencé), un témoin positif (Tube ensemencé) et un témoin
positif contenant les mêmes proportions d’éthanol que le tube 1, sont incubé avec les tubes de
dilution pendant 20 heures à 30°C.
La détermination de la concentration minimale inhibitrice est effectué par estimation visuelle
de l’apparition ou non de trouble dans les tubes incubé et la CMI correspond à la plus petite
concentration ayant resté limpide.
2.3.3.2.5. Détermination de la CMB
Un ensemencement par strie est effectué dans une boite de Pétri à partir des tubes des
différentes dilutions qui sera par suite incubé à 37°C pendant 24 heures.
Cette étape va nous permettre de déterminer la CMB qui correspond à la dilution qui arrive à
tuer les microorganismes présents dans le tube (se manifeste par l’absence de biomasse sur la
strie), et de confirmer les résultats de CMI.
Pour s’assurer que l’éthanol, utilisé comme solvant pour le produits à tester n’a pas d’effet
bactéricide sur les souches testées, un ensemencement par strie, sur boite de Pétri, à partir des
témoins positifs qui en contiennent a été effectué.
2.3.4. Estimation in vivo de l’effet antimicrobien
2.3.4.1. Test de phytotoxicité
La phytotoxicité a été estimée par la détermination de l’indice de germination selon Zucconi
et al. en 1981. Dix graines de tomate de la variété Lycopersion esculentum ont été semées
dans une boite de Pétri contenant 3 ml d’une solution aqueuse du produit P493 (0 µg/ml, 25
µg/ml, 100 µg/ml, 200 µg/ml et 1000 µg/ml).
U.P.M.C./U.S. 116
2010