Resumos

os animais com deficiência de Cx32 apresentaram redução no índice de
proliferação celular, aumento da taxa de apoptose e da atividade necroinflamatória
no tecido hepático. E conseqüente elevação nos níveis séricos
das enzimas hepáticas. Atualmente sabe-se que as conexinas podem afetar
o processo de morte celular por vários mecanismos envolvendo as junções
comunicantes do tipo gap (Decrock et al., 2009). Jeong et al. (2000) estudaram
os efeitos apoptóticos e necróticos da administração de cadmio no fígado de
camundongos. O tratamento reduziu a comunicação pelas junções gap e a
expressão das conexinas 26 e 32 no tecido hepático. Os autores relataram
que os danos à homeostasia tecidual, provocados pela redução na
comunicação intercelular, podem ser responsáveis por desencadear o processo
apoptótico. O presente trabalho apresentou resultados semelhantes em relação
ao aumento da apoptose perante a diminuição da comunicação intercelular
nos animais Cx32 -/- . Ott et al. (2006) estudaram a incidência de apoptose no
tecido hepático em camundongos knockout para as conexinas 26 e 32, os
quais apresentaram aumento significativo em comparação aos animais wildtype.
Marx-Stoelting et al. (2008) submeteram camundongos knockout para
Cx32 ao carcinógeno hepático N-nitrosodietilamina e observaram aumento na
apoptose. Apesar de estudos reportarem a ocorrência de apoptose no tecido
cirrótico, os mecanismos permanecem obscuros (Kremer et al., 2009) e a
influência das conexinas na apoptose dos hepatócitos envolvidos no processo
cirrótico é pouco conhecida. Assim, o modelo de cirrose hepática nos animais
Cx32 -/- demonstrou que esta deficiência influenciou as alterações morfológicas
e funcionais sofridas pelos hepatócitos. Assim, o maior grau de lesões necroinflamatórias,
aliado a um desequilíbrio entre as taxas de proliferação celular
e de apoptose, promoveram uma maior deposição de colágeno em resposta
à injúria celular.
Animais deficientes em Cx43
Fig. 1: (A) Wild-type; (B) Cx43 +/- . Fig. 2: Microscopia eletrônica de varredura.
(A) Animal normal; (B) Wild-type; (C) Cx43 +/- . Fig. 3: Colororação de picrossírius
e morfometria do colágeno. (B) Cx43 +/- , (C) Wild-type. Fig. 4: Análise
histopatológica. (A) Wild-type; (B) Cx43 +/- . Hematoxilina-Eosina. Barra de escala
= 20 m.
Animais deficientes em Cx32
Conclusão
Pela primeira vez a função das conexina 32 e 43 foi avaliada no microambiente
da cirrose hepática. Nós demonstramos que camundongos deficientes em
Cx32 ou Cx43 apresentaram aumento na fibrose após indução de injúria
hepática crônica por tetracloreto de carbono. No entanto, o aumento na
deposição de colágeno no parênquima hepático observada em cada modelo
animal foi desencadeado por mecanismos diferentes. Em conclusão, os
resultados obtidos neste trabalho demonstram a importante participação da
comunicação intercelular e a influência dos diferentes tipos de conexinas no
controle da fibrose hepática. E por fim, a melhor compreensão destes
mecanismos no processo de fibrogênese pode revelar novas ferramentas no
controle e tratamento da cirrose hepática.
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Fig. 1: Colororação de picrossírius e morfometria do colágeno. Barra de
escala = 150 m. Fig. 2: Reação de imunofluorescência para colágeno tipo I.
(A) Wild-type; (B) Cx32 -/- . Barra de escala = 50 m. Fig. 3: Quantificação de
hepatócitos PCNA-positivos por mm² de tecido hepático. Fig. 4: Quantificação
de corpúsculos apoptóticos por mm² de tecido hepático.
ATIVAÇÃO DO RECEPTOR B1 DE CININAS PROTEGE FÍGADO DE FIBROSE
Karina Maxeniuc Silva; Marcia Regina Nagaoka; Durval Rosa Borges; João
Bosco Pasquero; Maria Kouyomdjian
RESUMO
As ações biológicas e os efeitos farmacológicos da bradicinina (BK) são
mediados por dois receptores, um constitutivo (B 2
R) e outro induzido (B 1
R).
No fígado, nós verificamos que a resposta hipertensiva portal à BK é mediada
por receptores B 2
, mas não por receptores B 1
, tanto em ratos normais quanto
naqueles submetidos a diferentes agentes de agressão hepática. Nesta última
situação verificamos que há aumento da expressão de B 1
R com a progressão
para a cirrose. O objetivo deste trabalho é verificar se o B 1
R está envolvido
no processo de fibrogênese. Para tanto fibrose foi induzida em camundongos
knockout de B 1
R (KOB 1
R) e selvagens com injeções intraperitoniais (ip) de
CCl 4
(6 semanas). Grupos controles receberam injeções ip de óleo pelo
mesmo período. Após uma semana da última injeção, os fígados foram
exanguinados, retirados, pesados e processados. A fibrose foi avaliada por
análise histológica (coloração com Picrus-Sirius), e quantificada pelo programa
AxionVision 4.5 da Carl Zeiss. A ativação das células estreladas, célulaschave
na fibrogênese, foi estudada pela expressão de “heat shock protein”-
47 (HSP 47) analisada por Western Blotting. A indução da fibrose com CCl 4
foi
obtida com sucesso nos camundongos selvagens e KOB 1
R, com o tradicional
padrão de formação de septos hexagonais. Pela análise morfométrica, a
quantidade de colágeno (% da área total) nos animais KOB 1
R-CCl 4
(1,9 0,3,
n=5) é significativamente maior (ANOVA, p = 0,006) que nos animais selvagens-
CCl 4
(1,0 0,2, n=7), bem como quando comparado com o respectivo controle
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