Analysen des hämatopoetischen Chimärismus - TOBIAS-lib ...

Zeiser et al. haben in ihrer Studie keine Erfolge in der Immuntherapie erzielen kön-
nen, die aufgrund eines inMC initiiert worden sind [112].
Es stellt sich die Frage, ob der prinzipielle Erfolg einer Immuntherapie bei den
akuten Leukämien nur durch eine Intervention vor dem eigentlichen Rezidivge-
schehen zu erreichen ist, also vor dem Nachweis autologer Anteile in den Blasten-
assoziiierten Subpopulationen und letztendlich nur auf dem Unterbinden einer
Toleranz beruht.
6.7 MRD und Chimärismusanalysen
6.7.1 Methode der Real-Time PCR von Ig/TCR-Rearrangemets
Die Bestimmung der residualen Blastenlast ist in diesem Labor über den Nachweis
von Ig/TCR-Rearrangemets mit Hilfe der Real-Time-PCR erfolgt.
Neale et al. haben die Durchflußzytometrie mit der RT-PCR in den kindlichen ALL-
Formen verglichen. Letztere stellen die am meisten genutzten Techniken zur Vali-
dierung der MRD dar. Die Forschergruppe hat von 227 Patienten insgesamt 1375
Proben untersucht, die sowohl aus dem Knochenmark als auch aus dem Vollblut
gewonnen worden sind. Die durchflußzytometrische Analysen sind bei 95,8 % der
Patienten anwendbar gewesen; Ig/TCR-Rearrangements haben sich bei 88,9 %
nachweisen lassen. Bezüglich der MRD-Detektion ist eine weitgehende Überein-
stimmung der Ergebnisse erreicht worden. Es zeichnet sich eine etwas höhere
Sensitivität der RT-PCR ab (0,001 vs. 0,01 %) [76].
Der Nachteil der RT-PCR beruht auf einer Instabilität der Ig/TCR-Rearrangements.
Dieser liegt begründet in dem Wandel der malignen Zellklone, der zu Verände-
rungen der MRD-Marker führt. Die Folge sind falsch negative Resultate. Durch den
Gebrauch mehrerer Marker kann diese Fehlerquelle auf weniger als 5 % reduziert
werden [34].
6.7.2 Vergleich der RT-PCR mit der STR-PCR in den Subpopulationen
Bis zum jetzigen Zeitpunkt ist für die minimale Rest Erkrankung kein einheitlicher
Schwellenwert beschrieben worden, der einem Rezidiv vorraus geht. Die Angaben
variieren zwischen Zahlen von 10 -5 bis 10 -3 [75].
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