Analysen des hämatopoetischen Chimärismus - TOBIAS-lib ...

6.10 Aktueller Stand der Forschung und Aussichten
Alizadeh et al. haben erstmals von dem Gebrauch der RT-PCR für Chimä-
rismusanlysen berichet. Sie verwenden hierbei Single-Nucleotid-Polymorphismen
(SNPs) und haben in ihren Untersuchungen eine Sensitivität zwischen 0,1 und 0,01
% errreicht. Durch den Einsatz von 11 Markern ist diese Methode bei bis zu 90 %
der Patienten anwendbar gewesen. Ein großer Nachteil dieser Technik liegt jedoch
in der niedrigen quantitativen Reproduzierbarkeit [5;66]. Handelt es sich um den
Nachweis sehr geringer Anteile eines gemischten Chimärismus, ist diese
Ungenauigkeit zu tolerieren. Übersteigen die autologen Zellen jedoch einen Anteil
von 5 %, sind Ergebnisvariationen bis zu 50 % möglich. Für eine quantitative
Beurteilung des Chimärismusverlaufs ist diese Methode daher nicht geeignet. Der
Variationskoeffizient der STR-PCR beträgt dagegen nur 5 % [19]. Koldenhoff et al.
vergleichen die STR-PCR mit der RT-PCR von den SNPs und von den Y-
Chromosom spezifischen Sequenzen. Sie erzielen durch Chimärismusanalysen mit
der RT-PCR ebenalls eine höhere Sensitivität und können mit RT-PCR den
Zeitraum zwischen der ersten MC-Detektion und dem Rezidivausbruch von 30 auf
bis zu 120 Tage ausweiten (p = 0,007). Aufgrund der hohen Sensitivität und der
damit einhergehenden Verfälschung der Ergebnisse durch die Verunreinigungen
der Knochenmarksproben mit Stromazellen haben sie für die Analysen Peripherblut
verwendet [57].
Es ist zu überlegen, ob diese Methode auch auf Knochenmarksproben übertragen
werden kann, wenn diese vorher durch Selektionsvorgänge aufgereinigt würden.
So könnte der Zeitraum zwischen einem ersten MC und einem Rezidiv weiter aus-
gebaut werden. Aufgrund der geringen Reproduzierbarkeit der RT-PCR-Ergebnisse
ist jedoch diese Methode für die weitere Verlaufskontrolle zum aktuellen Zeitpunkt
ungeeignet.
Um therapieassoziierte Komplikationen zu reduzieren, sind die T-Zell-Depletion der
Transplantate und die non-myeloablative Konditionierung in die Therapieschemata
eingeführt worden. Infolge der gehäuften Entwicklung gemischter Chimäre besteht
die Möglichkeit, unter der Kontrolle des Chimärismus diese Therapieverfahren
durch DLI zu unterstützen, und somit eine vollständigen Donor-Hämatopoese
erreichen zu können. Antin et al. bewerten in diesem Kontext die Bedeutung
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