DIAZ_CESAR_1167D.pdf

elongación neta es más rá pida en un extremo que se denominó extremo "más" y
el otro extremo que crece más lento se denominó extremo "menos". Esta
denominación es la que se utiliza en los microtúbulos y se refiere a una
polaridad estructural intrínseca del filamento.
3.4.1. Polimerización de BtubA/8 a diferentes concentraciones de KCI :
inestabilidad dinámica y "treadmilling"
3.4.1.1 . Observación directa de la polimerización
Para determinar las diferencias en la polimerización a diferentes
concentraciones de KCI y correlacionarlas con los resu ltados anteriores, se
visualizó la polimerización de BtubA/B en presencia de KCI 12,5 y 100,0 mM.
Para comparar la polimerización a estas dos concentraciones de KCI se eligió
una concentración de BtubA/B 3,0 ¡.J M. Esto significa que para KCI 12,5 mM la
concentración de BtubA/B se encuentra por debajo del valor de la concentración
crítica determinado por el método de dispersión de luz (4,5 1-J M). Sin embargo,
con KCI 100,0 mM , BtubA/B está por sobre el valor de la concentración crítica
(2,3 IJM) determinada por el mismo método.
Para iniciar la reacción se agregó GTP 1 ,O mM final a una solución de
BtubA/B 3,0 ¡JM, BtubA/B-TAMRA 30%, en amortiguador de po limerización con
KCI 12,5 mM , se mezcló y se hizo fluir inmediatamente en el canal (cámara) de
la reacción. Se registró la reacción de polimerización por 1 O minutos a intervalos
de 2 segundos y se observó crecer a los filamentos de BtubA/B a partir de sólo
un extremo de las "semillas" (Figura 198; Video Suplementario 2). No se
observó crecimiento a partir del otro extremo de la "semilla". Esto se debería a
que en el ensamblaje de un polímero polar que hidroliza GTP durante la
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