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TABLA DE CONTENIDOS ÍNDICE DE TABLAS ................................................ .............. ...... .. .. .. ............ viii ÍNDICE DE FIGURAS ................ ........................................ .............................. ix LISTA DE ABREVIATURAS ............................................................................ xi RESUMEN .......... .. ......................................................................................... xvi SUMMARY ...... ............... .. ................ ............................ .. ............................. xviii 1. INTRODUCCIÓN ....................... .............. .......................................... .. ........ 1 1.1. El citoesqueleto de los eucariontes versus el de las bacterias .. ........... 1 1.2. Proteínas homólogas de a/¡3-tubulina: FtsZ, BtubAJB, TubZ ..... ..... .. ... .4 1.3. Dinámica de los filamentos del citoesqueleto ........ .................. .. .. ....... 12 1.4. La división de bacterias Verrucomicrobia ... ..... ... ................................ 23 1.5. Hipótesis ........................... ........................................................ .. ... .... 26 1.6. Objetivos ... .... .. ........... ... ....... .. ..... ...... .. .. ... .......... .. .. ... ............. ..... ....... 27 2. MATERIALES Y MÉTODOS ........ ............................................................. 28 2.1. MATERIALES ............................................. ... .................................... 28 2.2. MÉTODOS ........... .. ............. ... ......................... ... ................................ 29 3. RESULTADOS ............................................ ........ ...................................... 46 3.1. Purificación de BtubAJB y marcaje con sondas fluorescentes ... ....... .. 46 3.2. Caracterización del efecto de potasio sobre la polimerización y la actividad GTPásica de BtubAJB ............................................ .. ... ... .... .49 3.3. Determinación de la polaridad cinética y estructural de los filamentos de BtubA/B ........ .. .............. ......... .. .................................... 77 vi
3.4. Visualización y determinación de la dinámica de polimerización de los filamentos_ individuales de BtubA/8 .... .... ........ .... .............. ........ 80 4. DISCUSIÓN ............................................................................................. 101 4.1. Purificación de BtubAIB por ciclos de polimerización y despolimerización ... ................................................................... .. .... 102 4.2. Ensamblaje cooperativo: modelo de nucleación-elongación .... .. ...... 103 4.3. La hidrólisis de GTP ........ .. .... .. ..... .............. .. ...... .. .... ........................ 110 4.4. Polaridad estructural y dinámica de polimerización de los filamentos de BtubAIB .................. ...... .......................................... ... 113 4.5. Significancia biológica del mecanismo de polimerización de BtubA/B . ............. .. .. .. ............................................................... .. ...... 119 5. CONCLUSIONES .................................................................................... 123 BIBLIOGRAFÍA ...................................... ...................................................... 124 Apéndice A: Proteínas del citoesqueleto bacteriano ............................... 135 Apéndice B: Análisis de la nucleación de Nishída y Sakai ...................... 140 Apéndice C: Modelo teórico del mecanismo de "treadmilling" ............... 143 vii
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2. Se cortaron dos trozos largos de
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BIBLIOGRAFÍA • Abhayawardhane, Y
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• de Boer, P., Crossley, R. , y R
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• Heidemann, S. R. , y Wirtz, D.
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• MacNeal, R.K., y Purich , D.L.
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• Petroni, G., Spring, S., Schlei
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• Wachi, M., y Matsuhashi, M. (19
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A e k+ 2 8 velocidad de polimerizac
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