DIAZ_CESAR_1167D.pdf

2. Se cortaron dos trozos largos de la cinta adhesiva doble y se colocaron
cuidadosamente sobre el portabojetos, sin tocar la parte de la cinta
adhesiva que quedó libre y que contactará al cubreobjetos. Para obtener
un canal de 12 ¡.¡L de flujo, se requiere una separación de 4 mm entre
los dos trozos de la cinta adhesiva y el canal debe estar orientado de
forma perpendicular a la cara larga del portaobjetos.
3. Se cortó los extremos de la cinta adhesiva hacia abajo y a lo largo de!
portaobjetos con un cuchillo cartonero o una hoja de afeitar.
4. Se colocó con mucho cuidado sobre las cintas adhesivas (en un
movimiento) un cubreobjetos lavado con ácido, con su cara larga
perpendicular a la cara larga del portaobjetos. Se usó una punta de
pipeta P1 000 para presionar suavemente el cubreobjetos en la zona de
contacto con la cinta adhesiva hasta que ésta se puso más oscura, lo
que asegura un buen sellado.
5. Se dió vuelta el canal y se colocó en la cámara húmeda sobre los
palillos.
6. Se colocó la solución con la pipeta sobre el cubreobjetos, cerca de la
entrada del canal. La capilaridad hizo fluir la solución hacia el canal.
7. Se lavó el canal con papel filtro (o papel absorbente) para succionar la
solución desde el otro extremo del canal , mientras se pipeteó solución
cerca de la entrada del canal. El volumen de la solución de lavado fue
de 10 veces el volúmen del canal.
8. Se hizo fluir la muestra, con al menos dos volúmenes del canal, lo que
aseguró un intercambio total.
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