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ausencia de KCI, el tamaño del núcleo era de sólo una subunidad (o un
heterodímero de BtubA/B), pero con el incremento de KCI , el tamaño del
núcleo aumentó consecutivamente a 2, 3 y 4 subunidades (Tabla 2) . En el caso
de un polímero helicoidal de doble hebra como la actina o su homólogo ParM ,
el núcleo está compuesto de tres subunidades (Garner y cols ., 2004; Oosawa y
Kasai, 1962). Para BtubA/B un núcleo de tres subunidades se forma a
concentraciones de KCI fisiológicas (1 00-200 mM) (Tabla 2). Es evidente que el
aumento de la concentración de proteína en cada condición de KCl disminuyó
el tiempo de la fase de latencia (Figura 11 ; Figura 12) y aumentó la velocidad
relativa de nucleación (Figura 148; Tabla 2). Esto sugiere que la formación del
núcleo se debe a varias reacciones de asociación secuenciales entre las
subunidades de BtubA/B. A partir de esto surge la pregunta: ¿por qué a mayor
concentración de KCI la velocidad de nucleación es mayor? Esto parece
contradictorio, pues para formar un núcleo con un número mayor de
subunidades se requiere de más reacciones de asociación entre las
subunidades de BtubA/B, lo que llevaría a incrementar la duración de la fase de
latencia. Una posible respuesta es que el incremento de KCI favorecería la
formación del heterodímero de BtubA/B, pues un paso esencial del ensamblaje
de BtubA/B es la formación del heterodímero antes de que se puedan
ensamblar en protofilamentos (Sontag y cols., 2009). La constante de
disociación de la dimerización en ausencia de GTP determinada por
sedimentación al equilibrio está entre 3 y 7 1-JM (HEPES 50 mM (pH 7,7) ; MgAc
5 mM; KAc 350 mM ; EGTA 1 mM) y la adición de GMPCPP a dímeros
mutantes de BtubA/B incapaces de polimerizar tiene un efecto mínimo en la
formación del dímero (Sontag y cols., 2009). Sin embargo, la constante de
disociación de la dimerización (KD) es casi un orden de magnitud más pequeña
que la concentración crítica de la polimerización que es de 0,5 1-JM (Sontag y
cols., 2005) y ésta se obtuvo en una alta concentración de potasio (350 mM).
Sontag señala que el mecanismo de ensamblaje cooperativo que produce esa
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