DIAZ_CESAR_1167D.pdf

7. Se agregó 200 mL de etanol 70% (Merck, grado HPLC) en agua
Notas:
nanopura y se sonicó igual que en el paso 4.
8. Se agregó 200 mL de etanol 95% (Merck, grado HPLC) en agua
nanopura y se sonicó igual que en el paso 4.
9. Se agregó 200 mL de etanol 95% (Merck, grado HPLC) en agua
nanopura. Los cubreobjetos se pueden almacenar en esta solución.
1 O. Antes de usar, los cubreobjetos se lavaron con agua nanopura y se
secaron en un horno o con una corriente de aire/nitrógeno filtrada.
• El protocolo original utiliza 30 min de sonicación, sin embargo 20 min
son suficientes.
• Los cubreobjetos se pueden almacenar en etanol 95% (paso 9) por al
menos 2 semanas y probablemente un poco más.
• En el protocolo original del laboratorio de Ted Salmen no se indica como
secar los cubreobjetos justo antes de ser usados. Cuando se seca
directamente el etanol en un horno funciona , pero algunas zonas no se
observan correctamente. Para un mejor resultado es recomendable
lavarlos con agua nanopura (3 veces) y secarlos en un horno o con una
corriente de aire/nitrógeno filtrada .
Cubreobjetos cubiertos de Poli-L-Lisina (PLL)
1. Se lavó los cubreobjetos con agua nanopura y se removió el exceso de
agua dando toques con el vértice del cubreobjetos sobre papel filtro
absorbente.
2. Se sumergió los cubreobjetos en una placa de petri con PLL 0,1 % w¡v
(Sigma P8920) y se secaron por 30 min a temperatura ambiente en una
gradilla de cubreobjetos cubiertos por un "taper" para evitar el material
40