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Figura 15. Determinación del tamaño del núcleo y de las velocidades relativas de nucleación de BtubA/8 ..................... .. .. .. .............. ....... 70 Figura 16. Determinación de la concentración crítica de la polimerización de BtubAIB por sedimentación a alta velocidad . .. .. ........................ 72 Figura 17. Actividad GTPásica de BtubAIB en presencia de diferentes concentraciones de KCI. ............ ............................ .. ...................... 76 Figura 18. Determinación de la polaridad de ensamblaje de !os filamentos de BtubAIB ......... .. ................................ .... .. ...... .. .. ... 78 Figura 19. Microscopía confocal de la polimerización in vitro de los filamentos individuales de BtubAJB ........... .. .. .... ........ .. ............ ....... 86 Figura 20. Inestabilidad dinámica de un filamento individual de BtubAJB: interconversiones entre las fases de crecimiento y acortamiento . .. 88 Figura 21. "Treadmilling" de un filamento individual de BtubA/8 ............ .......... 91 Figura 22. Dependencia de la velocidad de polimerización de BtubAIB en función de la concentración de proteína . .. .. .... .. .. ........ . 95 Figura 23. Microscopía confocal de la polimerización de los filamentos individuales de BtubAJB con GMPCPP y GTP ............. . 99 Figura 24. Microscopía confocal de la polimerización de los filamentos individuales de BtubA/B con GTP y cantidades subestequiométricas de GMPCPP ............... .. .... ........ .. ................ 100 Figura 25. Modelos de la dinámica de polimerización de BtubAIB ............... . 118 Figura 26. Diagrama de la polimerización de un filamento polar . .. ................ 149 X
[P] : concentración de polímeros [S): concentración de subunidades LISTA DE ABREVIATURAS [SJ ec: concentración de subunidades en el equilibrio dinámico, equivalente al valor de la concentración crítica [s·]: concentración de subunidades disponibles para polimerizar y equivale a la concentración inicial de subunidades menos la concentración crítica lmáx: intensidad máxima de la señal de dispersión de luz Vmáx: velocidad máxima de la polimerización n: número de subunidades que forman el núcleo Ce: concentración crítica C/: concentración crítica en el extremo "más" o de crecimiento rápido del polímero e;;: concentración crítica en el extremo "menos" o de crecimiento lento del polímero Kn: constante de equilibrio para la formación de un núcleo de n subunidades Kec: constante de equilibrio de asociación de las subunidades con el polímero en el estado estacionario Kfc: constante de equilibrio para la asociación de subunidades con NDP KJc : constante de equilibrio para la asociación de subunidades con NTP dn/ dt; v: suma de las velocidades netas de elongación en unidades de nú mero de subunidades n adicionadas por segundo en los dos extremos del polímero dn+ 1 dt; v-t-: velocidad neta de elongación en unidades de número de subunidades n adicionadas por segundo por polímero en el extremo "más" xi
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2. Se cortaron dos trozos largos de
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3.2.2. Efecto de KCI sobre la activ
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sugiere que la formación de manojo
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A B Figura 18. Determinación de la
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elongación neta es más rá pida e
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especto a la polaridad del filament
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posible seguirlos individualmente,
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pues se sintetizaron con GMPCPP. Si
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3.4.2. Determinación de las consta
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3.4.3. Polimerización de BtubA/8 e
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4. DISCUSIÓN La función celular d
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polimerización. Además, después
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de los filamentos indujo una intera
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evidente que en la elongación part
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4.4.1. Treadmilling De acuerdo a la
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polimerización y de despolimerizac
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4.5. Significancia biológica del m
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es la hidrólisis de GTP. El "tread
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BIBLIOGRAFÍA • Abhayawardhane, Y
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• de Boer, P., Crossley, R. , y R
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• Heidemann, S. R. , y Wirtz, D.
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• MacNeal, R.K., y Purich , D.L.
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• Petroni, G., Spring, S., Schlei
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• Wachi, M., y Matsuhashi, M. (19
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sido agrupados en dos clases (Shih
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campo magnético local o inducido (
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Apéndice B: Análisis de la nuclea
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eactantes. Por lo tanto, la constan
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de equilibrio para la asociación d
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A e k+ 2 8 velocidad de polimerizac
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