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Cinética de polimerización de BtubA/8 a baja y alta concentración de KCI.
El incremento de la señal de dispersión de luz debido al aumento de la
concentración de KCI se debe a la disminución de la concentración crítica de la
polimerización, lo que permite que la proteína disponible para polimerizar sea
mayor, y también se debe a la formación de manojos de filamentos, porque
éstos dispersan la luz más efectivamente que los filamentos simples (Polka y
cols. , 2009). Esto dificulta el análisis y comparación del efecto de KCI sobre las
cinéticas de polimerización de BtubNB. Por este motivo, para poder comparar
la cinética de polimerización a baja y alta concentración de KC\, se utilizó
condiciones experimentales para cada concentración de KCI en las que se
mantuvo constante la concentración de polímeros formados en el máximo o
estado estacionario (==4 ¡JM). Este valor equivale a la proteína disponible para
polimerizar y se calculó a partir de la diferencia entre la concentración de
BtubNB usada y la concentración crítica de cada condición salina determinada
por dispersión de luz. Estas condiciones experimentales fueron:
8tubA/8 (IJM) KCI (mM) Ce (IJM) [8tubA/8] - Ce
11 ,25 3,13 7,25 4 ,00
8,44 12,50 4,46 3,98
6,33 100,0 2,30 4,03
4,75 500,0 0,79 3, 96
Se observa que las cinéticas de polimerización en presencia de KCI 3,13
y 12,5 mM tienen un máximo de intensidad parecido, con un comportamiento
sigmoídeo en el cual se aprecian claramente las etapas de nucleación y de
elongación y la despolimerización (Figura 14A). Sin embargo, las cinéticas de
polimerización en presencia de KCI 100,0 y 500,0 mM muestran una señal de
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