DIAZ_CESAR_1167D.pdf

4. DISCUSIÓN
La función celular de BtubA/B es aún desconocida y se cree que
contribuye a la peculiar forma de tallo que tienen las especies de
Prosthecobacter. Por este motivo, en este trabajo de tesis se determinó in vitro
el mecanismo de polimerizacion y la estructura de los polímeros de BtubA/B,
pues esta aproximación es fundamental para entender el control del
ensamblaje de los filamentos de BtubA/B en la célula en el contexto del
citoesqueleto bacteriano. Los tres principales resultados obtenidos en este
trabajo son:
1. El ensamblaje de los filamentos de BtubA/B se ajusta al modelo de
nucleación-condensación.
2. Los filamentos de BtubA/B son estructuralmente polares.
3. Los filamentos de BtubA/B exhiben inestabilidad dinámica y
"treadmilling".
La caracterización de la polimerización de BtubA/B en función de la
concentración de cloruro de potasio permitió desarrollar un nuevo método para
purificar la proteína y también permitió controlar la polimerización para el
desarrollo de los ensayos de polaridad y los ensayos de la visualización de las
dinámicas de polimerización de los filamentos individuales de BtubA/B. Al
considerar la alta concentración de potasio intracelular que debería tener
Prosthecobacter (200-400 mM en el citoplasma de E. co/1) (Cayley y cols.,
1991 ; Record y cols., 1998), se hizo necesario determinar el mecanismo de la
estimulación de la polimerización de BtubA/B por KCI, en términos de entender
el control del ensamblaje de BtubA/B in vivo.
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