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Anais da VI Jornada de Iniciação Científica (JINC) - Embrapa ...

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% viabili<strong>da</strong><strong>de</strong> celular% viabili<strong>da</strong><strong>de</strong> celular% viabili<strong>da</strong><strong>de</strong> celular<strong>JINC</strong> – 6ª Jorna<strong>da</strong> <strong>de</strong> Iniciação Científica <strong>Embrapa</strong>SIPEX – II Seminário <strong>de</strong> Pesquisa e Extensão <strong>da</strong> UnC25 <strong>de</strong> outubro <strong>de</strong> 2012 – Concórdia/SCAVALIAÇÃO DO MECANISMO DE AÇÃO ENVOL<strong>VI</strong>DO NO EFEITO NEUROPROTETOR DOÁCIDO DOCOSAHEXAENÓICO (DHA) EM UM MODELO IN <strong>VI</strong>TRO DE ISQUEMIA CEREBRALOlescowicz, G. 1 * ; Kraus, J. R. 1 ; Ludka, F.K. 1 ; Molz, S. 11 Laboratório <strong>de</strong> Pesquisa, Curso <strong>de</strong> Farmácia, FUnC, Canoinhas/SC.Palavras-chave: isquemia, neuroproteção, DHAIntroduçãoA privação <strong>de</strong> glicose e oxigênio (PGO) resultante <strong>da</strong>interrupção do fornecimento <strong>de</strong> sangue durante aisquemia cerebral causa estresse oxi<strong>da</strong>tivo, aumento <strong>da</strong>liberação <strong>de</strong> glutamato, excitotoxici<strong>da</strong><strong>de</strong> e morte celular.(1). A a<strong>de</strong>nosina tem papel neuromodulator através <strong>da</strong>ativação <strong>de</strong> receptores A1, A2A, A2B e A3, que resultaem neuroproteção frente a isquemia cerebral in vivo efrente a mo<strong>de</strong>los <strong>de</strong> PGO que utilizaram fatias <strong>de</strong>hipocampo. O ácido docosahexaenoico (DHA) é um ácidograxo <strong>da</strong> família ω-3 que apresenta potente efeitoneuroprotetor (2). Tendo em vista que a ativação <strong>de</strong>receptores <strong>de</strong> a<strong>de</strong>nosina e o DHA são neuroprotetores, oobjetivo <strong>de</strong>ste trabalho foi investigar o envolvimento <strong>da</strong>ativação <strong>de</strong> receptores <strong>de</strong> a<strong>de</strong>nosina no efeitoneuroprotetor do DHA em fatias <strong>de</strong> hipocamposubmeti<strong>da</strong>s a PGO, um mo<strong>de</strong>lo in vitro <strong>de</strong> isquemiacerebral.O efeito neuroprotetor do DHA frente a morte celularinduzi<strong>da</strong> pela PGO foi completamente preveni<strong>da</strong> napresença <strong>de</strong> um antagonista <strong>de</strong> receptor A1 <strong>de</strong> a<strong>de</strong>nosina(DPCPX 100nM, 68% <strong>de</strong> viabili<strong>da</strong><strong>de</strong> celular, n=6, Figura2a) e parcialmente prevenido na presença <strong>de</strong> antagonistaA2B <strong>de</strong> a<strong>de</strong>nosina (aloxazina 0,1µM, 70% <strong>de</strong> viabili<strong>da</strong><strong>de</strong>celular, n=6, Figura 2b) ou <strong>de</strong> antagonista A3 <strong>de</strong>a<strong>de</strong>nosina (VUF5574, 1µM, 72% <strong>de</strong> viabili<strong>da</strong><strong>de</strong> celular,n=6, Figura 2c). O efeito neuroprotetor do DHA não foialterado na presença <strong>de</strong> um antagonista <strong>de</strong> receptor A2A<strong>de</strong> a<strong>de</strong>nosina (ZM241385 50nM, 78% <strong>de</strong> viabili<strong>da</strong><strong>de</strong>celular, n=6, Figura 2d).15010050** ** * *#15010050*** ** ** * #Materiais e MétodosUtilizou-se camundongos machos swiss (60-90dias)(CEUA 986/09). As fatias <strong>de</strong> hipocampo foram préincuba<strong>da</strong>sna presença do DHA em tampão HEPESsalinae gaseifica<strong>da</strong>s com O 2. Posteriormente este meiofoi retirado e as fatias foram então incuba<strong>da</strong>s por 15minutos com DHA em tampão HEPES-salina on<strong>de</strong> a D-glucose foi substituí<strong>da</strong> por 2-<strong>de</strong>oxy-glucose (PGO) egaseifica<strong>da</strong>s com N 2, seguido <strong>de</strong> 2 horas <strong>de</strong> reperfusãoem tampão HEPES-salina com O 2. A viabili<strong>da</strong><strong>de</strong> celularfoi avalia<strong>da</strong> através do método MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromi<strong>de</strong>). Osresultados foram analisados por ANOVA <strong>de</strong> uma viaseguido do teste <strong>de</strong> Tukey e consi<strong>de</strong>rados significativosquando p

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