Na rys. 13 pokazano kilka chromatogramów otrzymanych bez przeładowaniakolumny (w warunkach „analitycznych – piki gaussowskie) i w warunkachprzeładowania stężeniowego (piki pozostałe), otrzymane z przekroczeniemliniowości zakresu odpowiedzi detektora UV, jak i zastosowaniemkilku sposobów postępowania dla uniknięcia przekroczenia liniowego zakresuwskazań detektora - bardzo mała droga optyczna – 2 mm, a nawet0.5 mm, i / albo wybór długości fali o niskich wartościach absorbancji molowejrozdzielanych substancji – 220 nm, albo 290 nm, zamiast 250 nm.Rys. 13 Przykłady kilku chromatogramów uzyskanych dla tych samych ilości estrów kwasu4OH benzoesowego rozdzielanych w warunkach typowego przeładowania stężenia kolumny,z wyjątkiem gaussowskich pików narysowanych linią cienką ciągłą, które dotyczą braku przeładowania;W warunkach przeładowania stężenia zastosowano następujące warunki detekcji:280 nm, 2,56 AU/FS, kuweta 10 mm280 nm, 1.28 AU/FS, kuweta 0,5 mm254 nm, 1.28 AU/FS, kuweta 0,5 mmZamieszczone ilustracje i podpisy pod nimi, umożliwiają uzyskanieogólnej orientacji w zakresie stosowanych operacji jednostkowych i alternatywnychsposobów ich realizacji w praktyce w chromatografii cieczowejw skali preparatywnej lub procesowej. Opis bardziej szczegółowy przekraczaramy tego opracowania. Zainteresowany czytelnik powinien skorzystać zespecjalistycznej literatury, albo z bardziej obszernego podręcznika na tematpreparatywnej i procesowej chromatografii cieczowej.KOLUMNY DO <strong>CHROMATOGRAFII</strong> PREPARATYWNEJ I PROCESOWEJ– WYMAGANIA I ZASADY ICH SPEŁNIENIA W PRAKTYCEKolumny do chromatografii preparatywnej są zawsze bardziej skomplikowanejkonstrukcji, niż do kolumny do chromatografii analitycznej. Jed-102
nakże, w kolumnach preparatywnych zachodzą takie same zjawiska fizykochemicznei hydrodynamiczne jak w kolumnach analitycznych. Dotyczy tozasad opisu retencji i selektywności układu chromatograficznego, a takżezjawisk decydujących o sprawności rozdzielania i wpływających na liczbępółek teoretycznych kolumny, z zastrzeżeniem, konieczności rozpatrywania,w obu wypadkach, warunków przekroczenia zakresu liniowości izotermysorpcji, tzn. rozpatrywania warunków przeładowania kolumny.W związku z wykorzystywaniem do celów preparatywnych i procesowychkolumn o znacznie większej średnicy niż kolumny analityczne pojawiająsię dodatkowe trudności oraz problemy. Jednym z nich jest koniecznośćzapewnienia równomiernego rozprowadzenia roztworu rozdzielanych substancjioraz eluentu na całym przekroju poprzecznym wypełnienia kolumnyi takiego samego odbierania eluatu opuszczającego kolumnę. Musi to zapewnićoptymalna konstrukcja głowic - rozprowadzających eluent na powierzchniwarstwy wypełnienia kolumny i zbierających eluat z powierzchnizłoża kolumny.Istnieje wiele konstrukcji preparatywnych kolumn chromatograficznych,w których powyższe wymagania zostały w różny sposób - najczęściejpoprawnie - rozwiązane. Na rys. 14 zamieszczono kilka przykładów schematówbudowy kolumn chromatograficznych, stosowanych do preparatywnego,albo procesowego rozdzielania substancji, a w opisie rysunku zamieszczonopotrzebne wyjaśnienia.Ważny problem, to zapewnienie długookresowej stabilności wypełnieniakolumny, gdy stosunek średnicy kolumny i średnicy ziarna wypełnieniaczęsto jest większy od 1000, a nawet 10000, a ziarna wypełnienia są wyjątkowomałych rozmiarów. W tych warunkach oddziaływania ścian - stabilizującestrukturę złoża w kolumnie, tak ważne w reaktorach chemicznych z wypełnieniem,albo także w kolumnach analitycznych - w kolumnachprocesowych i preparatywnych praktycznie nie ma miejsca. W tej sytuacjiszczególne znaczenie ma poprawne, równomierne i zwarte (ale nie nadmierniezwarte) upakowanie kolumny. Wykorzystywane są też dodatkowo,specjalne sposoby stabilizacji struktury złoża w czasie rozdzielania, takie jaktzw. „dynamiczna kompresja aksjalna” (DAC), lub kompresja „aksjalno--radialna”, lub ma miejsce kompresja złoża w kolumnie za pomocą mechanizmuśrubowego, niekiedy z zastosowaniem sprężyn regulujących siłę dociskuprzesuwnej głowicy (patrz rys. 14).Poprawne działanie głowicy wlotowej - wprowadzającej ciecz do kolumnyi wylotowej, wyprowadzającej eluat z kolumny oraz charakter profiluprzepływu cieczy w warstwie wypełnienia kolumny preparatywnej, lub procesowej,zależny od właściwości złoża (promieniowego rozkładu porowatościmiędzy-ziarnowej i promieniowego rozkładu ziaren pod względem wielkości,i ma decydujący wpływ na szerokość i kształt pików chromatograficznychotrzymywanych z zastosowaniem kolumny preparatywnej, bądź procesowej,niezależnie od stopnia przeładowania kolumny. Sprawność kolumny mierzonaliczbą półek teoretycznych (N), nie powinna zależeć od średnicy kolumny.Tylko wówczas może mieć miejsce całkowite podobieństwo warunków103
- Page 1 and 2:
POSTĘPY CHROMATOGRAFIIPraca zbioro
- Page 3:
SPIS TREŚCIPrzedmowa..............
- Page 7 and 8:
Piotr M. SŁOMKIEWICZ 1 , Zygfryd W
- Page 9 and 10:
W komorze 2 znajduje się pojemnik
- Page 11 and 12:
czyna przypływać przez komorę 2
- Page 13 and 14:
4Cnapięcie [mV]3Rys. 6. Chromatogr
- Page 15 and 16:
Bronisław K. GŁÓD 1 , Paweł PIS
- Page 17 and 18:
Rys. 1. Metabolizm dopaminyL-dopa p
- Page 19 and 20:
Dopamina, której niedobór w czę
- Page 21 and 22:
katecholowej oraz kompleksowaniu ż
- Page 23 and 24:
typu skonstruowano w Instytucie Ele
- Page 25 and 26:
takich jak zmęczenie czy stres. Dr
- Page 27 and 28:
CPA SUROWICY KRWI PACJENTÓW Z CHOR
- Page 29 and 30:
mo wyższych stężeń w surowicy e
- Page 31:
LITERATURA1. C. Courderot-masuyer,
- Page 34 and 35:
dopuszczające leki jak np. FDA nie
- Page 36 and 37:
W przypadku przeprowadzania analizy
- Page 38 and 39:
pompaHPLCkolumna chiralnakolumnarea
- Page 40 and 41:
25. K. Lorenz, E. Yashima, Y. Okamo
- Page 42 and 43:
Tlen, chociaż jest konieczny do ż
- Page 44 and 45:
σ2∗pπ * 2pπ 2pσ 2psingletowy
- Page 46 and 47:
Rozpuszczalność tlenku azotu w wo
- Page 48 and 49:
nia wolnych rodników. Dlatego nie
- Page 50 and 51:
na do nich również poliaminy biog
- Page 52 and 53: trwały rodnik, możliwy do oznacze
- Page 54 and 55: cej zmiany stężenia detektora lub
- Page 56 and 57: Rodniki hydroksylowe są wyjątkowo
- Page 58 and 59: COOHOCOCH3aspirynahydrolizaCOOHCOC
- Page 60 and 61: W statycznej, chromatograficznej me
- Page 62 and 63: sowej. Warto zwrócić w tym przypa
- Page 64 and 65: 35. W. Pakszys, B.K. Głód, P.P. L
- Page 66 and 67: 95. A. Ghiselli, M. Serafini, F. Na
- Page 68 and 69: nych umożliwiających oznaczanie f
- Page 70 and 71: W monitoringu wód powierzchniowych
- Page 72: RT: 4.01 - 19.97IntensityIntensity1
- Page 75 and 76: Ciekawą rolę pełnią zbiorniki w
- Page 77: Stosowana w badaniach procedura ana
- Page 80 and 81: wania substancji, zwłaszcza, w ska
- Page 82 and 83: - Kolumnowa, elucyjna chromatografi
- Page 84 and 85: Przykłady a, a’, b, b’, c, c
- Page 86 and 87: ZJAWISKA PRZEŁADOWANIA KOLUMNY (PO
- Page 88 and 89: ZASADY OPTYMALNEGO STOSOWANIA PREPA
- Page 90 and 91: - przeładowanie objętościoweW ch
- Page 92 and 93: Średnica kolumnyNajbardziej celowe
- Page 94 and 95: Średnica ziaren wypełnienia kolum
- Page 96 and 97: RetencjaSilna retencja składników
- Page 98 and 99: OPERACJE JEDNOSTKOWE I TECHNOLOGIA
- Page 100 and 101: Rys. 10. Schemat ideowy chromatogra
- Page 104 and 105: fizycznych i hydrodynamicznych w ko
- Page 106 and 107: Nie opanowany do końca problem sta
- Page 108 and 109: Rys. 18. Przykłady reprezentowanyc
- Page 110 and 111: LITERATURA UZUPEŁNIAJĄCA (pozycje
- Page 112 and 113: 14. Hupe K.P. and Lauer H.H., J. Ch
- Page 114 and 115: stość izolowanych substancji. Pep
- Page 116 and 117: (SEC). Ostatnio, do tego celu wykor
- Page 118 and 119: 51243678 90 2 4 6 8 10 12 14 16Rys.
- Page 120 and 121: jące długie łańcuchy alkilowe,
- Page 122 and 123: Tabela 2. Modyfikatory fazy ruchome
- Page 124 and 125: nowymiennych, równorzędnie kation
- Page 126 and 127: UKŁADY ADSORPCYJNE I ADSORPCYJNO-J
- Page 128 and 129: CHROMATOGRAFIA ŻELOWAChromatografi
- Page 130 and 131: CHROMATOGRAFIA ODDZIAŁYWAŃ HYDROF
- Page 132 and 133: związków. Połączenie elektrofor
- Page 134 and 135: METODY DETEKCJI W CHROMATOGRAFII PE
- Page 136 and 137: [25] S.U. Sane, S.M. Cramer, T.M. P