POSTĘPY CHROMATOGRAFII - Zakład Chemii Analitycznej

Można stwierdzić, że w praktyce, większość niepowodzeń preparatywnegostosowania chromatografii cieczowej jest spowodowane nieumiejętnościązapewnienia tłokowego profilu przepływu eluentu w kolumnie orazwystarczającej stabilności mechanicznej wypełnienia kolumny. Na rysunku15 pokazano związek kształtu pików chromatograficznych z profilem przepływueluentu w kolumnie. Strefy substancji są w każdym przypadku rozdzielnew przestrzeni wypełnienia kolumny. Jednakże na wylocie z kolumnytylko tłokowy profil przepływu zapewnia całkowite rozdzielenie. W przypadkuprofilu nie tłokowego, dowolnego typu, na wylocie z kolumny następuje„wtórne” wymieszanie stref rozdzielonych w kolumnie.Rys. 15. Ilustracja uzasadniająca konieczność istnienia tłokowego (płaskiego) profilu przepływucieczy w przestrzeni wypełnienia kolumny preparatywnej oraz pokazująca niekorzystny wpływzniekształcenia stref w kolumnie z p-tu widzenia wymagań, co do czystości substancji:a) Kolumna charakteryzująca się tłokowym profilem przepływu eluentu;b) Kolumna o niższej przepuszczalności w rejonie przyściennym niż w pobliżu osi – półprzekrój;c) Kolumna o wyższej przepuszczalności w rejonie w przyściennym niż w pobliżu osi – półprzekrójRys. 16. Zestawienie odpowiadających sobie chromatogramów otrzymanych w warunkach brakuprzeładowania – a, b, c oraz w warunkach typowego przeładowania stężeniowego – a’, b’, c’z wykorzystaniem kolumny analitycznej (120x4 mm i.d.) – a, a’ oraz preparatywnej(120x32 mm i.d.) – b, b’; c, c’105