wania substancji, zwłaszcza, w skali procesowej, ponieważ to zawsze podrażałączne koszty.Warto też zwrócić uwagę, że doświadczenia ostatnich lat wykazały, iższczególnie efektywną ekonomicznie techniką rozdzielania i otrzymywaniasubstancji w skali preparatywnej i procesowej jest chromatografia z eluentemnadkrytycznym (P-SFC). Jednakże, można tą techniką rozdzielać tylkosubstancje trwałe termicznie oraz nisko i średnio polarne. Rozdzielanie substancjiwysoko polarnych napotyka na trudności związane z koniecznościąstosowania polarnego modyfikatora cieczy nadkrytycznej.W konsekwencji chromatografia cieczowa w skali preparatywnej lubprocesowej (P-LC, albo P-HPLC) jest obecnie powszechnie i szeroko stosowanątechniką rozdzielania i otrzymywania czystych substancji i to nie tylkow laboratoriach, do uzyskiwania wzorców i niewielkich ilości określonychzwiązków chemicznych dla mikrosyntez, czy zbadania właściwości nowo odkrytychlub zsyntetyzowanych indywiduów chemicznych, ale także w skaliprocesowej, do produkcji, np., insuliny, antybiotyków peptydowych, hormonów,glikozydów i innych substancji aktywnych biologicznie, w tym, leków itp.GŁÓWNE OBSZARY ZASTOSOWAŃ <strong>CHROMATOGRAFII</strong> W SKALIPREPARATYWNEJ I PROCESOWEJChromatografia w zastosowaniu do otrzymywania czystych substancjima dwie nazwy:- chromatografia preparatywna, gdy ilości otrzymywanych substancji sąniewielkie i otrzymywanie ma charakter sporadyczny;- chromatografia procesowa (produkcyjna, przemysłowa), gdy proces prowadzonyjest systematycznie, w sposób cykliczny lub ciągły, a ilość produktujest znacznie większa (np. otrzymywanie leku, produktu handlowego itp.).Od początku stosowania chromatografii technika ta była wykorzystywanadwukierunkowo: jako technika analityczna i jako sposób na wydzieleniez mieszaniny interesującego składnika (lub składników) mieszaniny.Przez wiele lat, w okresie poprzedzającym automatyzację i mikroprocesory,detekcja, analityka ilościowa, a także preparatyka, z zastosowaniem chromatografiicieczowej, opierała się na stosowaniu szklanej kolumny, wypełnionejsorbentem i zbieraniu kolejnych frakcji eluatu, ich analizie typowymitechnikami analitycznymi, np. spektrofotometrycznie, czy refraktometrią.Analityk musiał często użyć do analizy całą ilość wydzielonej substancji,szczególnie, w przypadku wykonywania analizy śladowej, albo wydzielaniaskładników występujących w bardzo niskich zawartościach. Im lepsze uzyskiwałrozdzielenie od składników towarzyszących, tym wynik był bardziejrzetelny. Na tym etapie rozwoju chromatografii granica pomiędzy chromatografią,jako techniką analityczną, czy służącą do otrzymywania czystychsubstancji nie była wyraźna. Wprowadzenie detektorów przepływowych i rejestratorów,a później komputerów, wyraźnie rozdzieliło te dwa obszary zastosowańchromatografii.80
W chromatografii analitycznej celem jest uzyskanie rozdzielenia interesujących(czasem wszystkich) substancji w jak najkrótszym czasie, z rozdzielczościąR = ok. 1. Dąży się do zmniejszenia skali procesu i oszczędnościdrogich składników eluentu przez zmniejszenie wymiarów kolumny,zwłaszcza średnicy, dbając równocześnie o jak najwyższą sprawność rozdzielania.Stosuje się niewielkie objętości roztworu dozowanej mieszaniny,by obniżyć do minimum tzw. rozmycie poza-kolumnowe. Ze względu na wysokączułość współczesnych detektorów ilość dozowanej próbki może byćbardzo mała (poza przypadkami analityki śladowej) i eluat traktowany jestjako ściek, który zostaje poddany utylizacji.W skali preparatywnej, lub procesowej stosuje się, natomiast, kolumnyo dużych średnicach i wysokie natężenia przepływu eluentu.Chromatografia w zastosowaniu preparatywnym jest powszechnieuważana za szczególnie efektywną technikę rozdzielania wieloskładnikowychmieszanin w celu otrzymywanie czystych substancji do zastosowańbadawczych lub mikrosyntez, gdy problem rozdzielczy należy do trudnych,lub bardzo trudnych, gdy możliwy do osiągnięcia współczynnik rozdzieleniainteresującej nas substancji i pasm towarzyszących jest niższy od 1.05.Również, w skali procesowej znajduje coraz więcej zastosowań do otrzymywaniasubstancji w ilości nawet do kilkudziesięciu kilogramów na dobę.Szczególnie, w nowoczesnym przemyśle farmaceutycznym można dzisiajspotkać hale produkcyjne, gdzie znajdują się, wyłącznie, kolumny chromatograficznei ich oprzyrządowanie w postaci pomp eluentu, pomp dozującychwsad, zbiorników, kolektorów frakcji, urządzeń do wzbogacania frakcji eluatuw postaci odparowywaczy próżniowych, lub membranowych wymiennikówmasy oraz urządzeń do izolacji substancji w postaci krystalicznej z frakcjieluatu.Najważniejsze dziedziny preparatywnych i procesowych zastosowańchromatografii to:- izolacja produktów biotechnologii, szczególnie białek i enzymów, polisacharydów,fosfolipidów, określonych fragmentów DNA, lub RNA itp.;- izolacja produktów naturalnych pochodzenia roślinnego lub zwierzęcego,- izolacja produktów oraz zanieczyszczeń powstałych podczas syntezy leków(farmaceutyków, składników kosmetyków itp.),- izolacja lantanowców i transuranowców,- izolacja użytkowych ilości substancji do badań i mikrosyntez w zakresiechemii organicznej, biochemii, mikrobiologii itp.,- izolacja izomerów optycznych.TECHNIKI I MECHANIZMY <strong>CHROMATOGRAFII</strong> UŻYWANEW ZASTOSOWANIACH PREPARATYWNYCH ORAZ NAJWAŻNIEJSZEZASADY POWIĘKSZANIA SKALI ROZDZIELANIATechniki chromatograficzne stosowane w skali preparatywnej i procesowej to:- Kolumnowa, elucyjna chromatografia cieczowa (P-LC, lub P-HPLC) – największyzakres preparatywnych i procesowych zastosowań chromatografii,81
- Page 1 and 2:
POSTĘPY CHROMATOGRAFIIPraca zbioro
- Page 3:
SPIS TREŚCIPrzedmowa..............
- Page 7 and 8:
Piotr M. SŁOMKIEWICZ 1 , Zygfryd W
- Page 9 and 10:
W komorze 2 znajduje się pojemnik
- Page 11 and 12:
czyna przypływać przez komorę 2
- Page 13 and 14:
4Cnapięcie [mV]3Rys. 6. Chromatogr
- Page 15 and 16:
Bronisław K. GŁÓD 1 , Paweł PIS
- Page 17 and 18:
Rys. 1. Metabolizm dopaminyL-dopa p
- Page 19 and 20:
Dopamina, której niedobór w czę
- Page 21 and 22:
katecholowej oraz kompleksowaniu ż
- Page 23 and 24:
typu skonstruowano w Instytucie Ele
- Page 25 and 26:
takich jak zmęczenie czy stres. Dr
- Page 27 and 28:
CPA SUROWICY KRWI PACJENTÓW Z CHOR
- Page 29 and 30: mo wyższych stężeń w surowicy e
- Page 31: LITERATURA1. C. Courderot-masuyer,
- Page 34 and 35: dopuszczające leki jak np. FDA nie
- Page 36 and 37: W przypadku przeprowadzania analizy
- Page 38 and 39: pompaHPLCkolumna chiralnakolumnarea
- Page 40 and 41: 25. K. Lorenz, E. Yashima, Y. Okamo
- Page 42 and 43: Tlen, chociaż jest konieczny do ż
- Page 44 and 45: σ2∗pπ * 2pπ 2pσ 2psingletowy
- Page 46 and 47: Rozpuszczalność tlenku azotu w wo
- Page 48 and 49: nia wolnych rodników. Dlatego nie
- Page 50 and 51: na do nich również poliaminy biog
- Page 52 and 53: trwały rodnik, możliwy do oznacze
- Page 54 and 55: cej zmiany stężenia detektora lub
- Page 56 and 57: Rodniki hydroksylowe są wyjątkowo
- Page 58 and 59: COOHOCOCH3aspirynahydrolizaCOOHCOC
- Page 60 and 61: W statycznej, chromatograficznej me
- Page 62 and 63: sowej. Warto zwrócić w tym przypa
- Page 64 and 65: 35. W. Pakszys, B.K. Głód, P.P. L
- Page 66 and 67: 95. A. Ghiselli, M. Serafini, F. Na
- Page 68 and 69: nych umożliwiających oznaczanie f
- Page 70 and 71: W monitoringu wód powierzchniowych
- Page 72: RT: 4.01 - 19.97IntensityIntensity1
- Page 75 and 76: Ciekawą rolę pełnią zbiorniki w
- Page 77: Stosowana w badaniach procedura ana
- Page 82 and 83: - Kolumnowa, elucyjna chromatografi
- Page 84 and 85: Przykłady a, a’, b, b’, c, c
- Page 86 and 87: ZJAWISKA PRZEŁADOWANIA KOLUMNY (PO
- Page 88 and 89: ZASADY OPTYMALNEGO STOSOWANIA PREPA
- Page 90 and 91: - przeładowanie objętościoweW ch
- Page 92 and 93: Średnica kolumnyNajbardziej celowe
- Page 94 and 95: Średnica ziaren wypełnienia kolum
- Page 96 and 97: RetencjaSilna retencja składników
- Page 98 and 99: OPERACJE JEDNOSTKOWE I TECHNOLOGIA
- Page 100 and 101: Rys. 10. Schemat ideowy chromatogra
- Page 102 and 103: Na rys. 13 pokazano kilka chromatog
- Page 104 and 105: fizycznych i hydrodynamicznych w ko
- Page 106 and 107: Nie opanowany do końca problem sta
- Page 108 and 109: Rys. 18. Przykłady reprezentowanyc
- Page 110 and 111: LITERATURA UZUPEŁNIAJĄCA (pozycje
- Page 112 and 113: 14. Hupe K.P. and Lauer H.H., J. Ch
- Page 114 and 115: stość izolowanych substancji. Pep
- Page 116 and 117: (SEC). Ostatnio, do tego celu wykor
- Page 118 and 119: 51243678 90 2 4 6 8 10 12 14 16Rys.
- Page 120 and 121: jące długie łańcuchy alkilowe,
- Page 122 and 123: Tabela 2. Modyfikatory fazy ruchome
- Page 124 and 125: nowymiennych, równorzędnie kation
- Page 126 and 127: UKŁADY ADSORPCYJNE I ADSORPCYJNO-J
- Page 128 and 129: CHROMATOGRAFIA ŻELOWAChromatografi
- Page 130 and 131:
CHROMATOGRAFIA ODDZIAŁYWAŃ HYDROF
- Page 132 and 133:
związków. Połączenie elektrofor
- Page 134 and 135:
METODY DETEKCJI W CHROMATOGRAFII PE
- Page 136 and 137:
[25] S.U. Sane, S.M. Cramer, T.M. P