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3 Einleitung
gebildet wird, ist IL12. Es wird von dendritischen Zellen produziert, um natürliche
Killerzellen zu aktivieren und die Differenzierung von CD4 + -T-Lymphozyten zur TH1-
Subpopulation anzuregen. Im Mausmodell wurde bereits beobachtet, dass die Ausschüttung
von den Zytokinen TNF-α, IFN-γ und IL12, die eine TH1-Antwort bedingen, eine Resistenz
gegen A. fumigatus bewirken kann (Cenci et al., 1997; Cenci et al., 1998; Cenci et al., 1999).
Dahingegen fördern die Zytokine IL4 und IL10 die Bildung von CD4 + -TH2-Lymphozyten und
somit ein Fortschreiten der Krankheit. Außerdem konnte gezeigt werden, dass bei Mangel an
TNF-α die Abtötung der Pilze reduziert war und somit die Sterberate anstieg (Mehrad et al.,
1999).
3.3 Modellsysteme
3.3.1 In vitro generierte dendritische Zellen
In vitro können aus isolierten Monozyten (CD14 + ) unter Zugabe von GM-CSF und IL4 in
Zellkulturmedium mit fetalem Kälberserum (FCS) unreife dendritische Zellen generiert
werden (moDCs) (Sallusto, Lanzavecchia, 1994; Grigoleit et al., 2002; Ahn, Agrawal, 2005).
CD1 Membranproteine werden als humane DC-Marker gewählt, da sie früh in der
Entwicklung von DCs exprimiert werden (Brigl, Brenner, 2004). moDCs exprimieren in
hohem Maße CD1a, CD1b und CD1c, weisen aber wenig CD1d auf (Spada et al., 2000).
Für T-Zell-Proliferationsassays ist es notwendig, in serumfreiem Medium unter GMP-
Bedingungen (Good Manufacturing Practice; Gute Herstellungspraxis) zu arbeiten, da dieser
Assay von klinischer Relevanz ist. Die Zukunft dieses experimentellen Ansatzes sieht vor,
einem Patienten mit invasiver Aspergillose Donor-Lymphozyten, die bereits Antigene von
A. fumigatus aufweisen, zu injizieren (Bozza et al., 2004; Shao et al., 2005). Dazu gibt es
Hinweise darauf, dass moDCs das FCS den T-Lymphozyten als lösliches Antigen
präsentieren können (Weksler et al., 1978). Aber bei der Generierung von moDCs mit
humanem Serum oder Plasma statt FCS wird die Expression der CD1 Marker durch die
Phospholipide Cardiolipin und Lysophosphatidylsäure unterdrückt, was einen Einfluss auf die
Proliferation CD1-spezifischer T-Lymphozyten hat (Leslie et al., 2008). Durch Zugabe von
Heparin kann bei der Generierung dendritischer Zellen aus Monozyten der Anteil CD1a + -
Zellen konzentrationsabhängig erhöht werden, da es die Bindung der Monozyten von IL4
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