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Dokument 1.pdf - OPUS - Universität Würzburg

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6 Ergebnisse<br />

6.6 Analysen des CXCL10-Gens<br />

Der letzte Teil dieser Studie beschäftigte sich mit dem Chemokin CXCL10, da sich eine<br />

Diskrepanz zwischen der home-made Microarray-Analyse (6.5.1) und einer früheren Analyse<br />

mittels Affymetix-Microarray-Analyse ergab. Ergänzend wurde die Expression des CXCL10-<br />

Gens in RAD-DCs, die ohne Behandlung, 6 h mit A. fumigatus Keimschläuchen oder 6 h mit<br />

LPS stimuliert waren, im Vergleich zu EtOH-DCs bei gleicher Behandlung betrachtet, aber es<br />

fanden sich keine signifikanten Unterschiede (Daten nicht gezeigt). Es wurde bereits<br />

publiziert (Mezger et al., 2008-2), dass SNPs im CXCL10-Gen die Expression desselben<br />

Gens beeinflussen. Deshalb wurden die SNPs in den sechs untersuchten Spendern mittels<br />

einer Schmelzkurvenanalyse überprüft.<br />

6.6.1 Analyse dreier SNPs im CXCL10-Gen<br />

Zur Analyse der SNPs im CXCL10-Gen wurden Sonden eingesetzt, die an der Stelle binden,<br />

an der sich der SNP befand. Somit ist die Schmelztemperatur abhängig davon, ob der Spender<br />

ein Wildtyp, eine Mutante oder heterozygot ist. Es stellte sich heraus, dass zwei Spender in<br />

allen detektierten SNPs heterozygot waren (Spender 5 & 6), zwei Spender in dem SNP<br />

rs1554013 den Wildtyp aufwiesen (Spender 1 & 2) und folglich im SNP rs3921 und im SNP<br />

rs4257674 die Mutation. Die letzten zwei Spender hatten in den SNPs rs3921 und rs4257674<br />

den Wildtyp (Spender 3 & 4) und im SNP rs1554013 die Mutation (Tab. 6.5). Somit<br />

exprimierten die Spender 3 und 4 aufgrund ihres unterschiedlichen Haplotyps eine viel höhere<br />

Menge an CXCL10-mRNA als die Spender 1 und 2. Durch diese Schwankungen der<br />

Expression des Gens abhängig vom Haplotyp lässt sich erklären, dass RAD keinen<br />

signifikanten Einfluss zeigte. Die Haplotypen einzeln zu betrachten, war aufgrund der<br />

geringen Anzahl an Spendern nicht möglich. Deshalb wurde darauf verzichtet, einen Schluss<br />

auf den Einfluss von RAD auf die Expression des CXCL10-Gens zu ziehen.<br />

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