TESIS COMPLETA.pdf - El Instituto Español de Oceanografía

Capítulo 2
de 10 millas de la costa y, libre de tensioactivos y otros contaminantes como confirmó su
análisis, fue filtrada por GF/F (Whatman) y posteriormente esterilizada filtrando por 0.22
µm (Sterivac-GP10 de Millipore).
2.3. METODOLOGÍA DE ANÁLISIS
2.3.1. Análisis de LAS y SPC por HPLC
El equipo de análisis consta de un cromatógrafo líquido de alta resolución (HPLC
HP 1050) equipado con un detector de fluorescencia (λ ex = 225 nm, λ em = 295 nm). Los
homólogos de LAS y SPC se separaron usando una columna Lichrosorb RP-8 de 250
mm de longitud y 4.6 mm de diámetro interno, con un tamaño de partícula de 10 µm
(Teknokroma), y el gradiente de elución mostrado en la tabla 2.2. El volumen de
inyección para todas las muestras fue generalmente de unos 100µL, que se introdujo por
medio de un inyector automático (HP 1100). La cuantificación de las muestras se realizó
usando patrones externos (LAS y/o SPC en agua de mar), tratados siguiendo el mismo
procedimiento analítico que las muestras.
Tabla 2.2. Régimen de gradiente empleado para la
separación de los homólogos de LAS y SPC. Flujo = 1
mL·min -1 . A: MeOH/H 2 O (80/20) +1.25 mM de
hidrogensulfato de tetraetilamonio. B: H 2 O.
Tiempo (min) A(%) B(%)
0 10 90
5 36 64
9 50 50
16 60 40
20 67 33
35 70 30
45 90 10
51 100 0
55 100 0
60 10 90
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