TRANSMISIÓN DE VIRUS POR ALIMENTOSPOR EL DR. ESTEBAN DOMINGO SOLANSC<strong>en</strong>tro <strong>de</strong> Investigación <strong>en</strong> Sanidad Animal (CISA-INIA)C<strong>en</strong>tro <strong>de</strong> Biología Molecu<strong>la</strong>r “Severo Ochoa” (CSIC-UAM)Introducción: patóg<strong>en</strong>os <strong>en</strong> alim<strong>en</strong>tosLos alim<strong>en</strong>tos son un factor importe <strong>de</strong>transmisión <strong>de</strong> ag<strong>en</strong>tes patóg<strong>en</strong>os y por tanto<strong>de</strong> iniciación <strong>de</strong> brotes <strong>de</strong> <strong>en</strong>fermedad. En unmundo creci<strong>en</strong>tem<strong>en</strong>te globalizado subyace <strong>la</strong>posibilidad <strong>de</strong> que <strong>la</strong> transmisión alim<strong>en</strong>taria<strong>de</strong> patóg<strong>en</strong>os sea un factor <strong>de</strong> emerg<strong>en</strong>cia oreemerg<strong>en</strong>cia <strong>de</strong> <strong>en</strong>fermeda<strong>de</strong>s infecciosas. Eneste artículo se resum<strong>en</strong> <strong>la</strong>s principalesobservaciones acerca <strong>de</strong> <strong>la</strong> transmisión <strong>de</strong>virus por alim<strong>en</strong>tos y se sugier<strong>en</strong> medidas quepodrían paliar el problema.¿Qué son los virus?Los virus son elem<strong>en</strong>tos g<strong>en</strong>éticos con <strong>la</strong>ssigui<strong>en</strong>tes propieda<strong>de</strong>s que los <strong>de</strong>fin<strong>en</strong>:• Conti<strong>en</strong><strong>en</strong> ácido <strong>de</strong>soxirribonucleico (DNA) oácido ribonucleico (RNA) como materialg<strong>en</strong>ético, pero no ambos.• Su g<strong>en</strong>oma conti<strong>en</strong>e un programa g<strong>en</strong>éticopropio.• Su replicación (o multiplicación), que implica<strong>la</strong> expresión <strong>de</strong> su programa g<strong>en</strong>ético, estotalm<strong>en</strong>te <strong>de</strong>p<strong>en</strong>di<strong>en</strong>te <strong>de</strong> <strong>la</strong> célu<strong>la</strong>. Esta<strong>de</strong>p<strong>en</strong><strong>de</strong>ncia se refleja tanto <strong>en</strong> <strong>la</strong> utilización<strong>de</strong> estructuras celu<strong>la</strong>res como <strong>en</strong> <strong>la</strong>explotación <strong>de</strong> metabolismo celu<strong>la</strong>r.• El ciclo <strong>de</strong> vida <strong>de</strong> los virus incluye una faseintracelu<strong>la</strong>r, <strong>en</strong> <strong>la</strong> que ti<strong>en</strong>e lugar <strong>la</strong>multiplicación <strong>de</strong> los virus, y una faseextracelu<strong>la</strong>r, <strong>en</strong> <strong>la</strong> que exist<strong>en</strong> comopartícu<strong>la</strong>s autónomas transmisibles.Los virus son causa <strong>de</strong> graves <strong>en</strong>fermeda<strong>de</strong>shumanas como son el SIDA, varias formas <strong>de</strong>hepatitis, poliomielitis, <strong>en</strong>fermeda<strong>de</strong>shemorrágicas, sarampión o gripe.Los alim<strong>en</strong>tos como vehículos<strong>de</strong> transmisión <strong>de</strong> virusUna difer<strong>en</strong>cia fundam<strong>en</strong>tal <strong>en</strong>tre bacterias yvirus es que mi<strong>en</strong>tras <strong>la</strong>s primeras pue<strong>de</strong>n am<strong>en</strong>udo multiplicarse <strong>en</strong> alim<strong>en</strong>tos, los virus(salvo casos excepcionales) no pue<strong>de</strong>n hacerloya que los alim<strong>en</strong>tos no ofrec<strong>en</strong> el ambi<strong>en</strong>tecelu<strong>la</strong>r propicio para completar <strong>la</strong>s distintasfases <strong>de</strong> su ciclo multiplicativo. Estas fasesson: reconocimi<strong>en</strong>to <strong>de</strong> un receptor (oreceptores) <strong>en</strong> <strong>la</strong> superficie <strong>de</strong> <strong>la</strong> célu<strong>la</strong>,<strong>en</strong>trada <strong>de</strong>l virus <strong>en</strong> <strong>la</strong> célu<strong>la</strong>, <strong>de</strong>s<strong>en</strong>samb<strong>la</strong>je<strong>de</strong> <strong>la</strong>s partícu<strong>la</strong>s y liberación <strong>de</strong>l materialg<strong>en</strong>ético, expresión <strong>de</strong>l material g<strong>en</strong>ético,replicación <strong>de</strong>l g<strong>en</strong>oma viral, <strong>en</strong>samb<strong>la</strong>je <strong>de</strong>partícu<strong>la</strong>s prog<strong>en</strong>ie y salida <strong>de</strong> <strong>la</strong> célu<strong>la</strong>, conadquisición <strong>de</strong> membrana celu<strong>la</strong>r <strong>en</strong> el caso <strong>de</strong>virus con <strong>en</strong>vuelta (para una revisiónactualizada <strong>de</strong> los conceptos básicos <strong>de</strong>virología, ver Flint et al., 2004).Los alim<strong>en</strong>tos constituy<strong>en</strong> vehículos mecánicos<strong>de</strong> transmisión <strong>de</strong> virus. Por esta razón, <strong>la</strong>smedidas prev<strong>en</strong>tivas <strong>de</strong>b<strong>en</strong> <strong>en</strong>caminarse aevitar <strong>la</strong> contaminación <strong>de</strong> alim<strong>en</strong>tos por virus(medidas higiénicas) y a estudiar métodos <strong>de</strong><strong>de</strong>tección y <strong>de</strong> inactivación <strong>de</strong> virus, éstoscompatibles con el procesado <strong>de</strong> alim<strong>en</strong>tos(medidas prev<strong>en</strong>tivas).¿Cuántos virus exist<strong>en</strong> y cuálescontaminan los alim<strong>en</strong>tos?Exist<strong>en</strong> más <strong>de</strong> 30.000 especies víricas queafectan al hombre, animales, p<strong>la</strong>ntas u otrosorganismos celu<strong>la</strong>res, con una cantida<strong>de</strong>spectacu<strong>la</strong>r <strong>de</strong> tipos, subtipos y variantes,según ha reconocido <strong>de</strong>s<strong>de</strong> años una comisióninternacional <strong>de</strong>dicada a <strong>la</strong> c<strong>la</strong>sificación ynom<strong>en</strong>c<strong>la</strong>tura <strong>de</strong> los virus (van Reg<strong>en</strong>mortelet al., 2000).Des<strong>de</strong> el punto <strong>de</strong> virus <strong>de</strong> transmisión poralim<strong>en</strong>tos, nos interesa distinguir dos grupos<strong>de</strong> virus según <strong>la</strong> estructura <strong>de</strong> <strong>la</strong> partícu<strong>la</strong>vírica y otros dos tipos según <strong>la</strong> c<strong>la</strong>se <strong>de</strong> ácidonucleico que constituye su material g<strong>en</strong>ético.Según el tipo <strong>de</strong> partícu<strong>la</strong> los virus se c<strong>la</strong>sifican <strong>en</strong>:• Virus <strong>de</strong>snudos, formados por ácido nucleicoy proteína.• Virus con <strong>en</strong>vuelta, formados por ácidonucleico, proteína y una <strong>en</strong>vuelta lipídica <strong>de</strong>orig<strong>en</strong> celu<strong>la</strong>r.Según el tipo <strong>de</strong> ácido nucleico que constituyesu material g<strong>en</strong>ético, los virus se c<strong>la</strong>sifican <strong>en</strong>:• Virus con DNA• Virus con RNATodos ellos, a<strong>de</strong>más, pue<strong>de</strong>n t<strong>en</strong>er el ácidonucleico <strong>de</strong> una banda o <strong>de</strong> doble banda; og<strong>en</strong>oma segm<strong>en</strong>tado o no segm<strong>en</strong>tado.En algunos casos, un ácido nucleico distinto <strong>de</strong>lque se <strong>en</strong>cu<strong>en</strong>tra <strong>en</strong> <strong>la</strong> partícu<strong>la</strong> vírica es unintermediario necesario <strong>en</strong> el proceso <strong>de</strong>replicación. At<strong>en</strong>di<strong>en</strong>do a este intermediario sedistingu<strong>en</strong> cuatro estrategias replicativas:(1) DNA ➞ DNA(2) DNA ➞ RNA ➞ DNA(3) RNA ➞ RNA(4) RNA ➞ DNA ➞ RNA22
BIOTECNOLOGÍA Y SEGURIDAD ALIMENTARIAEjemplos <strong>de</strong>l grupo (1) son los virus herpes o<strong>de</strong> <strong>la</strong> virue<strong>la</strong>, <strong>de</strong>l grupo (2) el virus <strong>de</strong> <strong>la</strong>hepatitis B, <strong>de</strong>l grupo (3) virus <strong>de</strong> <strong>la</strong> hepatitisA, C, gripe o poliomielitis y <strong>de</strong>l grupo (4) losretrovirus <strong>en</strong>tre los que se hal<strong>la</strong> el virus <strong>de</strong> <strong>la</strong>inmuno<strong>de</strong>fici<strong>en</strong>cia humana.Los virus que más frecu<strong>en</strong>tem<strong>en</strong>te contaminanlos alim<strong>en</strong>tos son los virus <strong>de</strong>snudos por sumayor estabilidad, y los virus que incluy<strong>en</strong> RNAcomo material g<strong>en</strong>ético [grupos (2), (3) y (4)]probablem<strong>en</strong>te por su mayor frecu<strong>en</strong>cia <strong>en</strong> <strong>la</strong>naturaleza y su po<strong>de</strong>r adaptativo. En efecto,los virus RNA son altam<strong>en</strong>te variables y suspob<strong>la</strong>ciones no son <strong>en</strong>tida<strong>de</strong>s g<strong>en</strong>éticas<strong>de</strong>finidas, sino distribuciones complejas <strong>de</strong>mutantes que se <strong>de</strong>nominan cuasiespeciesvíricas (Domingo et al., 2001). Entre <strong>la</strong>smúltiples variantes que se produc<strong>en</strong>continuam<strong>en</strong>te durante <strong>la</strong> replicación viral, lospue<strong>de</strong> haber con mayor resist<strong>en</strong>cia al calor, avalores <strong>de</strong> pH no neutro, a <strong>la</strong> <strong>de</strong>secación, o aambi<strong>en</strong>tes proporcionados por productosalim<strong>en</strong>tarios.En una reci<strong>en</strong>te revisión (Koopmans y Duizer,2004), se <strong>de</strong>stacan los sigui<strong>en</strong>tes virus por sumayor probabilidad <strong>de</strong> ser transmitidos porcomida o agua:Norovirus (<strong>de</strong> <strong>la</strong> familia Caliciviridae, <strong>de</strong>snudos,RNA <strong>de</strong> una banda).Virus <strong>de</strong> <strong>la</strong> hepatitis A, poliovirus, otros<strong>en</strong>terovirus (<strong>de</strong> <strong>la</strong> familia Picornaviridae,<strong>de</strong>snudos, RNA <strong>de</strong> una banda).Rotavirus humanos (<strong>de</strong> <strong>la</strong> familia Rotaviridae,<strong>de</strong>snudos, RNA <strong>de</strong> doble banda).A<strong>de</strong>novirus (<strong>de</strong> <strong>la</strong> familia A<strong>de</strong>noviridae,<strong>de</strong>snudos, DNA <strong>de</strong> doble banda).Acciones prev<strong>en</strong>tivasLas principales acciones prev<strong>en</strong>tivas a tomarson:• Extremar <strong>la</strong>s medidas (mediante seminariosinformativos y administrando materiales <strong>de</strong>protección como guantes, etc.) para evitarque <strong>la</strong>s personas que manipu<strong>la</strong>n alim<strong>en</strong>tos(durante su preparación o <strong>en</strong>vasado) loscontamin<strong>en</strong>.• Incluir métodos <strong>de</strong> <strong>de</strong>tección <strong>de</strong> virus comoparte <strong>de</strong>l control <strong>de</strong> calidad <strong>de</strong> alim<strong>en</strong>tos.• Desarrol<strong>la</strong>r métodos <strong>de</strong> <strong>la</strong>boratorio fiables ys<strong>en</strong>sibles que puedan ser incorporados a losprocedimi<strong>en</strong>tos <strong>de</strong> control <strong>de</strong> calidad <strong>de</strong>alim<strong>en</strong>tos.• Increm<strong>en</strong>tar <strong>la</strong> inversión pública <strong>en</strong>investigación y animar co<strong>la</strong>boraciones <strong>en</strong>treexpertos <strong>de</strong> distintas áreas (ci<strong>en</strong>tíficosbásicos, médicos epi<strong>de</strong>miólogos, veterinarios,expertos <strong>en</strong> medio ambi<strong>en</strong>te, etc.) t<strong>en</strong><strong>de</strong>ntesa <strong>de</strong>sarrol<strong>la</strong>r nuevos procedimi<strong>en</strong>tos <strong>de</strong><strong>de</strong>tección <strong>de</strong> virus <strong>en</strong> alim<strong>en</strong>tos.Métodos <strong>de</strong> <strong>de</strong>tección <strong>de</strong> virusLos métodos para <strong>de</strong>tección <strong>de</strong> virus <strong>en</strong>muestras <strong>de</strong> paci<strong>en</strong>tes infectados son:• Visualización <strong>de</strong> partícu<strong>la</strong>s por microscopiaelectrónica.• Ais<strong>la</strong>mi<strong>en</strong>to <strong>de</strong> virus tras infección <strong>de</strong> célu<strong>la</strong>s<strong>en</strong> cultivo (una limitación es que varios virusimportantes no se multiplican <strong>en</strong> cultivoscelu<strong>la</strong>res).• Detección <strong>de</strong>l g<strong>en</strong>oma mediante hibridación asondas específicas, o mediante amplificación<strong>en</strong>zimática por reacción <strong>en</strong> ca<strong>de</strong>na conpolimerasas termoestables (PCR, standard <strong>en</strong>el caso <strong>de</strong> g<strong>en</strong>omas DNA; RT-PCR, PCRprecedida <strong>de</strong> retrotranscripción <strong>en</strong> el caso <strong>de</strong>g<strong>en</strong>omas RNA).• Detección <strong>de</strong> proteína vírica (por ELISA,hemadsorción <strong>en</strong> algunos casos, etc.).La exposición a un ag<strong>en</strong>te viral pue<strong>de</strong> tambiénevi<strong>de</strong>nciarse por <strong>la</strong> pres<strong>en</strong>cia <strong>de</strong> anticuerposantivíricos <strong>en</strong> sangre (suero). Para ello pue<strong>de</strong>emplearse ELISA o neutralización <strong>de</strong>infectividad (más apropiado para virus queinfectan célu<strong>la</strong>s <strong>en</strong> cultivos).Cada uno <strong>de</strong> estos procedimi<strong>en</strong>tos esrecom<strong>en</strong>dable para ciertos virus y <strong>de</strong>b<strong>en</strong>tomarse un número <strong>de</strong> precauciones respecto areproducibilidad, límites <strong>de</strong> <strong>de</strong>tección,posibilidad <strong>de</strong> falsos positivos o falsosnegativos, etc. (Koopmans y Duizer, 2004).Procesami<strong>en</strong>to <strong>de</strong> alim<strong>en</strong>tos paraeliminación <strong>de</strong> virusAlgunos procesos a los que pue<strong>de</strong>n sersometidos los alim<strong>en</strong>tos o el agua produc<strong>en</strong>pérdidas <strong>de</strong> infectividad <strong>de</strong> viruscontaminantes <strong>de</strong> 10 hasta más <strong>de</strong> 10.000veces. Ejemplos:• Ebullición <strong>de</strong> alim<strong>en</strong>tos líquidos (leche).• Tratami<strong>en</strong>tos térmicos (60 ºC, 30 min.) <strong>de</strong>alim<strong>en</strong>tos sólidos o líquidos• Pasteurización (70 ºC-72 ºC, 15 segundos a2 min.).• Conge<strong>la</strong>ción.• Acidificación.• Inactivación <strong>de</strong> virus <strong>en</strong> agua mediantecloración, tratami<strong>en</strong>to con ozono o radiaciónultravioleta.23