3.3. I<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong> EspeciesLas técnicas analíticas utilizadas <strong>en</strong> <strong>la</strong><strong>de</strong>terminación <strong>de</strong>l orig<strong>en</strong> <strong>de</strong> un producto, <strong>en</strong>concreto <strong>la</strong> especie animal o vegetal a partir <strong>de</strong> <strong>la</strong>que ha sido e<strong>la</strong>borado, son <strong>de</strong> gran importancia <strong>en</strong>el ámbito <strong>de</strong> <strong>la</strong> seguridad y calidad alim<strong>en</strong>tarias.Fundam<strong>en</strong>talm<strong>en</strong>te, permit<strong>en</strong> <strong>la</strong> <strong>de</strong>tección <strong>de</strong>casos <strong>de</strong> frau<strong>de</strong> económico. En ocasiones se<strong>en</strong>cu<strong>en</strong>tran a <strong>la</strong> v<strong>en</strong>ta ciertos alim<strong>en</strong>tos <strong>de</strong> calidadinferior bajo <strong>de</strong>nominaciones y con un costepropios <strong>de</strong> productos <strong>de</strong> alta gama.A<strong>de</strong>más, cuando se modifica <strong>la</strong> composicióncaracterística <strong>de</strong> un alim<strong>en</strong>to —mediante <strong>la</strong>sustitución <strong>de</strong> sus ingredi<strong>en</strong>tes habituales pormateria prima <strong>de</strong> m<strong>en</strong>or precio— sin indicarlo <strong>en</strong>el etiquetado pue<strong>de</strong>n originarse problemas <strong>de</strong>salud, como por ejemplo reacciones alérgicas, oconflictos religiosos y/ o culturales <strong>en</strong>tre losconsumidores 28 .Para <strong>la</strong> i<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong> <strong>la</strong> especie <strong>de</strong> proce<strong>de</strong>nciaes necesario disponer <strong>de</strong> marcadores bioquímicos,es <strong>de</strong>cir, molécu<strong>la</strong>s específicas <strong>de</strong> ese animal ovegetal (ácidos nucléicos, proteínas,...) quepermitan su discriminación fr<strong>en</strong>te a especiessimi<strong>la</strong>res. Asimismo, según <strong>la</strong> técnica <strong>de</strong> análisisseleccionada y <strong>la</strong> muestra <strong>de</strong> alim<strong>en</strong>to sometida aestudio pue<strong>de</strong> ser <strong>de</strong>seable que dichosmarcadores pres<strong>en</strong>t<strong>en</strong> cierta estabilidad a lostratami<strong>en</strong>tos propios (pasteurización,ultraconge<strong>la</strong>ción) <strong>de</strong>l procesado industrial.Algunos <strong>de</strong> los productos re<strong>la</strong>cionados con mayorfrecu<strong>en</strong>cia con frau<strong>de</strong>s alim<strong>en</strong>tarios son:• Derivados cárnicos, <strong>en</strong> especial, aquellose<strong>la</strong>borados a partir <strong>de</strong> mezc<strong>la</strong>s <strong>de</strong> carne. Se han<strong>de</strong>sarrol<strong>la</strong>do distintos métodos analíticos paraestablecer el orig<strong>en</strong> <strong>de</strong> estos productos. Muchos<strong>de</strong> ellos utilizan como marcadores proteínascaracterísticas <strong>de</strong> cada especie animal:– Proteínas miofibri<strong>la</strong>res que forman parte <strong>de</strong>l tejidomuscu<strong>la</strong>r esquelético: troponina I (termoestable)pres<strong>en</strong>te solo <strong>en</strong> <strong>la</strong> carne <strong>de</strong> cerdo 29 .– Proteínas con un grupo hemo: hemoglobinas,mioglobinas y citocromos C. Con el estudio <strong>de</strong>los distintos patrones <strong>de</strong> estas proteínas pue<strong>de</strong>ndifer<strong>en</strong>ciarse los tipos <strong>de</strong> carne utilizados <strong>en</strong> unproducto (porcino, vacuno...) 30 .• Pescados, mariscos y <strong>de</strong>rivados. La i<strong>de</strong>ntificación<strong>de</strong> <strong>la</strong>s distintas especies pue<strong>de</strong> resultar complicada<strong>en</strong> productos conge<strong>la</strong>dos, precocinados, ahumadoso <strong>en</strong> conserva así como <strong>en</strong> los texturizados(surimi) y se <strong>en</strong>cu<strong>en</strong>tra regu<strong>la</strong>da por el R.D.1380/2002, <strong>de</strong> 20 <strong>de</strong> diciembre. Los estudios máscomunes se llevan a cabo para difer<strong>en</strong>ciar lossigui<strong>en</strong>tes animales: atunes y bonitos, pecesp<strong>la</strong>nos como el l<strong>en</strong>guado, <strong>la</strong> p<strong>la</strong>tija, <strong>la</strong> sol<strong>la</strong> o elfletán, distintos tipos <strong>de</strong> merluzas, varias c<strong>la</strong>ses <strong>de</strong>ca<strong>la</strong>mares y almejas y otras especies <strong>de</strong> interéscomercial (sardina, boquerón, ar<strong>en</strong>que, mero,rape, cabal<strong>la</strong>...).• Productos lácteos don<strong>de</strong> el frau<strong>de</strong> pue<strong>de</strong><strong>de</strong>berse a <strong>la</strong> sustitución <strong>de</strong> <strong>la</strong>s proteínas <strong>de</strong> <strong>la</strong>leche por proteínas <strong>de</strong> soja (glicinina yβ-conglicinina) <strong>de</strong> m<strong>en</strong>or coste 31 o bi<strong>en</strong> por eluso no <strong>de</strong>c<strong>la</strong>rado <strong>de</strong> leche <strong>de</strong> vaca <strong>en</strong> <strong>la</strong>fabricación <strong>de</strong> quesos y otros <strong>de</strong>rivados <strong>de</strong> ovejao cabra. En este último ejemplo <strong>la</strong> pres<strong>en</strong>cia <strong>de</strong>β-<strong>la</strong>ctoglobulina A es un indicador <strong>de</strong> que se haañadido este tipo <strong>de</strong> leche 32 .• Miel. La evaluación <strong>de</strong> ciertas molécu<strong>la</strong>s pue<strong>de</strong>contribuir a establecer el orig<strong>en</strong> geográfico ybotánico <strong>de</strong> este alim<strong>en</strong>to. Por ejemplo, <strong>la</strong>pres<strong>en</strong>cia <strong>de</strong> proteínas <strong>de</strong>l pol<strong>en</strong> <strong>en</strong> niveles trazajunto con el perfil <strong>de</strong> f<strong>la</strong>vonoi<strong>de</strong>s y <strong>de</strong>compuestos f<strong>en</strong>ólicos <strong>de</strong>rivados <strong>de</strong>l ácidocinámico pue<strong>de</strong>n dar i<strong>de</strong>a <strong>de</strong> <strong>la</strong> especie vegetal<strong>de</strong> proce<strong>de</strong>ncia. También se han <strong>de</strong>scubiertomarcadores para cada tipo <strong>de</strong> miel; <strong>la</strong>hesperetina y el meti<strong>la</strong>ntrani<strong>la</strong>to se re<strong>la</strong>cionancon <strong>la</strong> miel <strong>de</strong> cítricos 33 .28 Wissiack, R.; <strong>de</strong> <strong>la</strong> Calle , B.; Bordin, G.; Rodríguez, A. R. (2003). “Scre<strong>en</strong>ing test to <strong>de</strong>tect meta adulteration through the<strong>de</strong>termination of hemoglobin by cation exchange chromatography with dio<strong>de</strong> array <strong>de</strong>tection” Meat Sci<strong>en</strong>ce, 64, pág. 427-432.29 Ch<strong>en</strong>, F. C.; Peggy Hsieh, Y-H. (2002). “Porcine troponin I: a thermostable species marker protein” Meat Sci<strong>en</strong>ce, 61,pág. 55-60.30 Wissiack, R.; <strong>de</strong> <strong>la</strong> Calle , B.; Bordin, G.; Rodríguez, A. R. (2003). “Scre<strong>en</strong>ing test to <strong>de</strong>tect meta adulteration through the<strong>de</strong>termination of hemoglobin by cation exchange chromatography with dio<strong>de</strong> array <strong>de</strong>tection” Meat Sci<strong>en</strong>ce, 64, pág. 427-432.31 López-Tapia, J.; García-Risco, M. R.; Manso. M. A.; López-Fandiño, R. (1999). “Detection of the pres<strong>en</strong>ce of soya proteinin milk pow<strong>de</strong>r”. Journal of Chromatography A, 836, pág. 153-160.32 Cartoni, G.; Coccioli, F.; Jasionowska, R.; Masci, M. (1999). “Determination of cows´ milk in goats´ milk and cheese bycapil<strong>la</strong>ry electrophoresis of the whey protein fractions” Journal of Chromatography, 846, pág. 135-14133 A<strong>la</strong>m, E. (1998). “A review of analytical methods to <strong>de</strong>termine the geographical and botanical origin of honey” FoodChemistry, vol 63, nº 4, pág. 549-562.34
BIOTECNOLOGÍA Y SEGURIDAD ALIMENTARIALa tab<strong>la</strong> 9 recoge varios ejemplos <strong>de</strong> marcadores bioquímicos utilizados <strong>en</strong> <strong>la</strong> i<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong> especies.A<strong>de</strong>más, algunas <strong>de</strong> estas molécu<strong>la</strong>s <strong>de</strong> naturaleza proteica se re<strong>la</strong>cionan con problemas <strong>de</strong>hipers<strong>en</strong>sibilidad <strong>en</strong> <strong>la</strong> pob<strong>la</strong>ción (proteínas <strong>de</strong> <strong>la</strong> soja y proteínas <strong>de</strong>l <strong>la</strong>ctosuero como <strong>la</strong>s β-<strong>la</strong>ctoglobulinas).Marcadores bioquímicos Peso molecu<strong>la</strong>r (kD) Orig<strong>en</strong>Troponina I 24β-<strong>la</strong>ctoglobulina A 36Carne <strong>de</strong> cerdoLeche <strong>de</strong> vacaGlicininaβ-conglicinina320-360370SojaHesperetinaMeti<strong>la</strong>ntrani<strong>la</strong>to——Miel <strong>de</strong> cítricosTab<strong>la</strong> 9. Marcadores bioquímicos específicos <strong>de</strong> diversos alim<strong>en</strong>tos o productos re<strong>la</strong>cionados con ellos.3.4. Biotecnología aplicada a<strong>la</strong> conservaciónLa conservación <strong>de</strong> alim<strong>en</strong>tos es uno <strong>de</strong> losaspectos c<strong>la</strong>ve <strong>de</strong> <strong>la</strong> seguridad alim<strong>en</strong>taria. Sondos <strong>la</strong>s contribuciones que <strong>la</strong> biotecnología hace aeste campo: <strong>la</strong>s bacteriocinas y <strong>la</strong> prolongación <strong>de</strong><strong>la</strong> vida útil <strong>de</strong> frutas.3.4.1. BacteriocinasLas bacteriocinas son péptidos <strong>de</strong> orig<strong>en</strong>microbiano, <strong>de</strong> pequeño tamaño, con propieda<strong>de</strong>santimicrobianas y un gran pot<strong>en</strong>cial como ag<strong>en</strong>tesconservantes naturales <strong>en</strong> alim<strong>en</strong>tos. Las másconocidas son <strong>la</strong> nisina, <strong>la</strong> pediocina y <strong>la</strong><strong>la</strong>ctococcina.Estas sustancias biológicam<strong>en</strong>te activas sonsintetizadas por bacterias ácido-lácticas. Su efectomicrobicida lo ejerc<strong>en</strong> contra especiesestrecham<strong>en</strong>te re<strong>la</strong>cionadas con <strong>la</strong> cepaproductora <strong>de</strong> <strong>la</strong> bacteriocina. También actúanfr<strong>en</strong>te a otros microorganismos <strong>en</strong>tre los que se<strong>en</strong>cu<strong>en</strong>tran muchas bacterias alterantes ypatóg<strong>en</strong>as frecu<strong>en</strong>tes <strong>en</strong> los productosalim<strong>en</strong>ticios.Su mecanismo <strong>de</strong> acción consiste <strong>en</strong> <strong>de</strong>struir <strong>la</strong>membrana p<strong>la</strong>smática microbiana mediante <strong>la</strong>formación <strong>de</strong> poros. Para ello, estos péptidos seun<strong>en</strong> a los fosfolípidos <strong>de</strong> <strong>la</strong> membrana coninteracciones electrostáticas. Posteriorm<strong>en</strong>te seinsertan <strong>en</strong> el<strong>la</strong> y originan agregados proteicos apartir <strong>de</strong> los cuales se forman los poros. A través<strong>de</strong> dichos poros se produce <strong>la</strong> salida <strong>de</strong> multitud<strong>de</strong> compuestos imprescindibles para <strong>la</strong> célu<strong>la</strong>(protones y otros iones, ATP, aminoácidos) lo que<strong>de</strong>s<strong>en</strong>ca<strong>de</strong>na su muerte <strong>de</strong>bido a <strong>la</strong> inhibición <strong>de</strong><strong>la</strong> síntesis <strong>de</strong> macromolécu<strong>la</strong>s y <strong>la</strong> producción <strong>de</strong><strong>en</strong>ergía.Gracias a sus propieda<strong>de</strong>s antimicrobianas <strong>la</strong>sbacteriocinas pue<strong>de</strong>n emplearse como ag<strong>en</strong>tesconservantes <strong>en</strong> alim<strong>en</strong>tos. De hecho, algunas <strong>de</strong>el<strong>la</strong>s ya se utilizan <strong>en</strong> productos lácteos, carnes yvegetales mínimam<strong>en</strong>te procesados.En un futuro próximo los aditivos químicos podríanreemp<strong>la</strong>zarse por estas sustancias naturales queproduc<strong>en</strong> microorganismos consi<strong>de</strong>rados segurospara <strong>la</strong> salud. A<strong>de</strong>más, se trata <strong>de</strong> compuestosque hidrolizan <strong>la</strong>s <strong>en</strong>zimas gástricas y que nog<strong>en</strong>eran metabolitos tóxicos al <strong>de</strong>gradarse, <strong>de</strong>manera que su inactivación e inocuidad <strong>en</strong> elorganismo queda garantizada.Entre <strong>la</strong>s características <strong>de</strong> <strong>la</strong>s bacteriocinas<strong>de</strong>stacan su resist<strong>en</strong>cia a <strong>la</strong>s altas temperaturas,<strong>la</strong> aci<strong>de</strong>z y <strong>la</strong> baja actividad <strong>de</strong> agua lo que amplíael número <strong>de</strong> productos don<strong>de</strong> serían aplicables.Asimismo, cuando se utilizan bacteriocinasparcialm<strong>en</strong>te purificadas se minimizan los cambios<strong>de</strong> textura y sabor <strong>en</strong> los alim<strong>en</strong>tos.La aplicación <strong>de</strong> técnicas biotecnológicas <strong>en</strong> estecampo ha permitido conocer <strong>la</strong>s característicasbioquímicas y g<strong>en</strong>éticas y el mecanismo <strong>de</strong> acción<strong>de</strong> muchas bacteriocinas, <strong>la</strong> caracterización ei<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong> <strong>la</strong>s cepas productoras así como35