Untersuchungen zu familiären und rassespezifischen ...

Augenmissbildungen bei homozygoter Merle-Mutation 84
beidseits eine geringgradige Mikrophthalmie, im linken Auge ein atypisches Kolobom
(4-5-Uhr-Position) (Abb. 2), und rechts eine persistierende Pupillarmembran (Iris-Iris)
(Abb. 3).
Ein für Merle heterozygoter Nachkomme aus der Australian Shepherd Familie (Tier
8) wies ein atypisches Iriskolobom (9-Uhr-Position) auf.
Molekulargenetische Untersuchungen
Bei Tier 4 (Nicht-Merle Hündin, Wurfgeschwister der für Merle homozygoten
Altdeutschen Hütehunde) konnte keine SINE-Insertionsmutation nachgewiesen
werden. Die Blue-Merle (Mm) Altdeutsche Hütehündin (Tier 1) war für die SINE-
Insertionsmutation des SILV-Gens heterozygot. Die beiden für Merle homozygoten
(MM) Altdeutschen Hütehunde (Tier 2 und 3) mit multiplen okulären Missbildungen
waren für diese Mutation im SILV-Gen homozygot.
Im Rahmen der Sequenzanalyse von SILV konnten im Vergleich zum Labrador
Retriever und der Referenzsequenz für den Hund (NC_006592.2) keine weiteren
Mutationen in den übrigen Exons und ihrer Intronübergänge identifiziert werden.
Die Analyse von Exon 11 und dem angrenzenden Intron 10 zeigte bei allen Hunden
mit mm-Genotyp eine vollständige Übereinstimmung zur Referenzsequenz,
unabhängig davon, ob sie einer Rasse angehörten, in welcher der Merle Faktor
vorkommt. Auch das Allel ohne die Insertionsmutation im SILV-Gen bei
heterozygoten Mm-Hunden entsprach der Referenzsequenz.
Die cDNA zeigte vollständige Übereinstimmung zwischen den Australian Shepherds
mit den Genotypen Mm und mm und der Referenzsequenz (XM_843204). Bei den
heterozygoten Mm-Tieren konnte eine Expression der SINE-Insertionsmutation nicht
nachgewiesen werden.
Die Länge der SINE-Insertionsmutation unterschied sich zwischen homozygoten
MM- und heterozygoten Mm-Hunden in der Agarosegelelektrophorese nicht. Bei der
Polyacrylamidgelelektrophorese konnte für alle drei Altdeutschen Hütehunde (Tiere 1
-3) mit dem Merle-Allel (MM, MM und Mm) sowie für den Altdeutschen Hütehund-
Australian Shepherd-Mischling (MM, Tier 5) die gleiche Länge der Insertion
festgestellt werden. Lediglich ein Australian Shepherd (Mm) zeigte ein um bis zu 5