Identifikation und Charakterisierung - OPUS - Universität Würzburg

Inhaltsverzeichnis
5.1 Cotransfektion der αβ-Ketten 78
5.2 Charakterisierung der Transfektanten 79
5.2.1 Charakterisierung der Transfektanten mittels FACS-Analyse 79
5.2.2 Charakterisierung der Transfektanten durch Aktivierung mittels
Antikörper
5.2.3 CD8-Transduktion der Transfektanten durch Retroviren 81
6. TZR JM22 als Modell-System für die Antigensuche 81
6.1 Klonierung der TZR-αβ-Kette und Expression im Maus-Hybridom 58α - β - 82
6.2 Ermittlung der Empfindlichkeit des TZR JM22 durch Peptidtitration 83
7. Versuch der Aktivierung der Transfektanten durch ein muskelspezifisches
Autoantigen oder ein ubiquitär exprimiertes Selbstantigen
7.1 Versuch der Aktivierung durch ein muskelspezifisches Autoantigen der
menschlichen Rhabdomyosarkom Zelllinie TE671
7.1.1 Expression der HLA-Moleküle auf TE671-Zellen 85
7.1.1.1 Charakterisierung der HLA-A*02-Transfektanten mittels FACS-Analyse 85
7.1.1.2 Nachweis der HLA-Expression auf RNA-Ebene 86
7.1.2 Versuch der Aktivierung der TZR-Transfektanten durch HLAexprimierende
TE671-Zellen
86
7.2 Versuch der Aktivierung der TZR-Transfektanten durch ein ubiqitär
exprimiertes Selbstantigen der autologen EBV-B-Zellen des Patienten 88
PM16488
8. Versuch der Identifizierung eines möglichen Antigens durch Positional
Scanning-Combinatorial Peptid Libraries (PS-CPL)
89
8.1 PS-CPL-Versuch mit den TZR JM22 transfizierten Maus-Hybridomzellen 89
8.2 PS-CPL-Versuch mit den TZR 435 transfizierten Maus-Hybridomzellen 90
8.3 Antigensuche mittels modifizierter PS-CPL 91
IV. Diskussion 93
V. Literaturverzeichnis 103
VI. Anhang 111
1. Sequenzen der verwendeten TZR-α- und β-Ketten 111
2. Abkürzungensverzeichnis 112
V
80
84
84