qualitative und quantitative untersuchungen an nervus suralis ...

Speicherung auf Wechselfestplatten archiviert. Zur Ablage der Aufnahmen ist von Unglaub
(1996) eine Programmroutine entwickelt worden, die es ermöglichte, in kurzer Zeit eine
relativ große Anzahl an Bildern zu speichern.
2.4 Morphometrie
Zur morphologischen Untersuchung wurde in der vorliegenden Arbeit ein Meßprogramm
benutzt, das aus Elementen des Bildverarbeitungssystems VIDAS 2.1 von Kontron (München)
bestand. Dieses eröffnete die Möglichkeit der interaktiven manuellen Messung. Die manuelle
interaktive Messung unterscheidet sich von der automatischen nicht interaktiven Messungen
dadurch, daß der Untersucher, indem er die Messungen selber vornehmen muß, entscheiden
kann, welche Nervenfasern gemessen werden. Das bisher verwendete manuelle Videoplan-
Meßprogramm von Kontron wurde an das VIDAS-System angepaßt (Unglaub 1996), dadurch
konnte im Gegensatz zur Videoplan-Routine auch auf gespeicherte Bilder zurückgegriffen
werden. Der Ablauf der Messung selbst wurde unverändert übernommen. Der manuelle
interaktive Meßvorgang bestand darin, den inneren und äußeren Umfang der Myelinscheiden
mit einem Cursor auf einem Digitizertablett zu umfahren, die Bewegungen des Cursors waren
dadurch auf dem Monitor, der das gespeicherte Videobild zeigte, als Lichtpunkt entsprechend
sichtbar. Wenn der Kreis geschlossen war, wurde die innen liegende Fläche vom Programm in
Pixel gemessen. Ewart et al. (1987) schlugen die Umfahrung des Faserumfangs als Methode
der Wahl vor, wenn man davon ausgeht, daß die Fasern in Wirklichkeit irregulär sind.
Weiterhin vereinfacht dies die Flächenmessung bei durch Fixierung verzerrten Fasern. Die
gewonnenen Daten wurden durch eine von Kontron erarbeitete Programmroutine verarbeitet.
Die Programmroutine wurde kalibriert, indem ein Latexpartikel von bekannter Größe
elektronenmikroskopisch aufgenommen, digitalisiert und anschließend ausgemessen wurde.
Dadurch konnten die in Pixel gemessenen Werte mit aus dieser Eichung gewonnenen
Faktoren in µm umgerechnet werden (Unglaub 1996). Die mittleren Durchmesser des Axons
und der Gesamtfaser wurden auf der Basis des flächengleichen Kreises
berechnet.
Flächengleicher Kreis:
24
Dfib=
Die gewonnen Daten mußten in ASCII-Dateien konvertiert werden und wurden dann
statistisch und graphisch analysiert. Dieses erfolgte mit den Programmen Statview (ABACUS,
Berkeley) und Canvas (DENEBA, Miami). Da die ermittelten Werte nicht der Gaußschen
Normalverteilung entsprachen, war es erforderlich, sie statistisch mit einem verteilungsfreien
Test zu untersuchen; der Mann-Whitney U-Test bot sich hier an. Um die Veränderungen
getrennt für große und kleine Nervenfasern beschreiben zu können, wurden die Fasern in zwei
Kollektive 6µm aufgeteilt.
Eine Ermittlung der Faseranzahl pro mm² über eine Hochrechnung der auf exemplarisch
aufgenommenen Videobildern gezählten Fasern, erwies sich als zu ungenau und wich zu sehr
2
Afib