Rôle de l'herpèsvirus humain de type 6 dans le ... - Epublications

Au sein du laboratoire de microbiologie de la faculté de pharmacie de Limoges, le gène
DR7 du variant B de l’HHV-6 est étudié. Une étude antérieure réalisée par l’équipe de recherche
a montré la présence de l’HHV-6 au sein de ganglions lymphatiques issus d’une cohorte de
patients atteints du lymphome de Hodgkin (LH), avec une forte prédominance du variant B
(Lacroix et al., 2007). Le séquençage de DR7 chez ces patients a montré que la séquence de ce
gène était proche de celle du gène de la souche Z29 (variant B) avec la présence possible de 7
mutations, deux trouvées fréquemment et cinq plus rarement, entraînant un changement d’acides
aminés selon le patient considéré (Pr Ranger-Rogez, résultats non publiés). L’ADN
correspondant à l’équivalent de l’ORF-1 décrit par Kashanchi et al. chez le variant B de l’HHV-
6, a par la suite été cloné à partir du prélèvement d’un patient représentatif de la cohorte étudiée,
afin d’être soumis à diverses études.
II. Surexpression de la protéine DR7 dans la lignée BJAB
Afin d’étudier l’influence de DR7 sur le comportement cellulaire, une stratégie d’expression
constitutive a été choisie, en utilisant un vecteur permettant une transcription et traduction de ce
gène de façon durable : le plasmide pTRIN76.
Le gène DR7 a donc été cloné au sein du plasmide pTRIN76, puis le vecteur recombinant
obtenu a été utilisé pour réaliser une transfection stable (figure 23). L’obtention de cellules
transfectées a été réalisée grâce à une sélection de ces dernières au G418, qui est un analogue de
la néomycine, le vecteur pTRIN76 possédant un gène de résistance à cet antibiotique.
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