Biologische Therapien und Krebs - the European Oncology Nursing ...

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Hybrid-Selektion genannt. Die produzierten Eiweisse werden dann mit denen verglichen, die
man erwartet.
Eine Genbank ist
eine Sammlung
einer genügenden
Menge Klone, die
mit hoher
Wahrscheinlichkeit
jedes einzelne
Gen eines
bestimmten
Genoms von
einem
Organismus
enthalten.
Die Genbank
Eine Genbank ist eine Sammlung einer genügenden Menge Klone, die mit hoher
Wahrscheinlichkeit jedes einzelne Gen eines bestimmten Genoms von einem Organismus
enthalten. Genbanken werden durch Reinigung der zellulären DNA hergestellt. Dies geschieht
durch Zerteilen der DNA mit Hilfe von Restriktionsenzymen, um eine Serie von Fragmenten zu
produzieren, die man in einen passenden Vektor klont. Es ist ebenfalls möglich, Chromosomenspezifische
Sammlungen anzulegen, die aus Fragmenten bestehen, welche von der DNA eines
bestimmten Chromosoms abstammen.
Gentechnologie
Um die Struktur und Funktion von einzelnen Proteinen, wie Onkoproteinen, zu studieren, ist es
nötig, genügend Proteine zur Verfügung zu haben. Die meisten Proteine in einer tierischen
Zelle, inklusive solcher mit sehr wichtigen Funktionen, sind nur in kleinen Mengen vorhanden.
Das macht es schwierig oder gar unmöglich, das reine Protein zu isolieren. Einer der
wichtigsten Beiträge des DNA-Klonens und der Gentechnologie für die Zellbiologie ist, dass es
nun möglich ist, Zellproteine auch in grossen Mengen zu produzieren. Die Gentechnologie
wendet rekombinante DNA-Technologie an, um das Gen für das gewünschte Eiweiss zu klonen
und es in ein speziell hoch replizierendes Stück der DNA, einem so genannten Expressions-
Vektor, einzusetzen. Dieser kann dann grosse Mengen des Proteins produzieren.
Die Gentechnologie hat wichtige therapeutische Auswirkungen. Zum Beispiel ist das Klonen
aller Gene für einen bestimmten biosynthetischen Pfad und deren Überexpression eine
Möglichkeit, um eine bestimmte intrazelluläre Komponente zu vermehren. Im Gegensatz dazu
ist es möglich, einen Pfad zu unterbrechen, um zu verhindern, dass ein bestimmtes Produkt
hergestellt wird. Es ist wichtig zu wissen, dass Gentechnologie nicht auf Proteine begrenzt ist.
Sie kann eine Überexpression aller zu klonenden Gene ermöglichen.
. . . kürzlich
haben Fortschritte
in der
Gentechnologie
nicht-menschliche
Quellen von
Antikörpern wie
Herceptin ® und
MabThera ®
ermöglicht.
Zudem ermöglicht die Gentechnologie den Aufbau von Proteinen von jeder gewünschten
Sequenz. Zum Beispiel haben kürzlich Fortschritte in der Gentechnologie nicht-menschliche
Quellen von Antikörpern wie Herceptin ® und MabThera ® ermöglicht. Humanisierte monoklonale
Maus-Antikörper (MAbs) machen Gebrauch von der Reverse-Transkriptase Polymerase
Kettenreaktion (RT-PCR, siehe Seite 5.15), um entweder variable oder hypervariable Regionen
des Antikörpers von der mRNA oder einem Hybridom (zum Beispiel von einer Maus) zu klonen,
und dann diese mit konstanten menschlichen Regionen zu fusionieren. Als Folge davon sind
mehr als 90% der Aminosäuren-Sequenzen des humanisierten MAb mit derjenigen des
menschlichen Proteins identisch. Auf diese Weise kann eine Neutralisierung durch das
menschliche Immunsystem vermieden werden. Durch die Wahl der entsprechenden Region für
die schwere Kette als Klonpartner, könnten mit diesem Ansatz Antikörper mit bestimmter Ziel-
Funktion entwickelt werden. Die daraus entstehenden Klone können dann in Zellkulturen grosse
Mengen von modifizierten Antikörpern produzieren. Die Grundlagen der Tier-Zellkulturen und
die Methode, rekombinante Gene in Tierzellen einzuführen, werden unten beschrieben.
Tier-Zellkulturen
Unter angepassten Bedingungen können die meisten Tierzellen in einer Gewebekulturschale
leben, sich teilen und differenzierte Eigenschaften aufweisen. Diese Art von Kultur wird in-vitro-
Kultur genannt. In dieser künstlichen Umgebung ist es möglich, die Zellen unter dem Mikroskop
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