Biologische Therapien und Krebs - the European Oncology Nursing ...

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Automatisierte zelluläre, bildgebende Systeme (ACIS) wurden als neue Technologie entwickelt
und sind so konstruiert, dass sie die Fehlerquote, die sich mit der individuellen Interpretation
einer Färbung ergibt, ausschalten. ACIS kombiniert Software für die farb-basierte Darstellung
mit der automatisierten Roboter-Mikroskop-Technologie und wurde beschrieben als genauere
Methode im Gegensatz zur qualitativen Einschätzung (Scoring).
Der Vorteil von
ELISA ist, dass die
Untersuchung mit
Blut und nicht mit
Tumorgewebe
gemacht werden
kann . . .
ELISA
Diese Technik einer Enzym-gebundenen, immunabsorbierenden Untersuchung (enzyme-linked
immunosorbent assay = ELISA) ist für Gewebe-Homogenate und Seren geeignet. Genau wie
bei IHC, wird bei dieser Methode ein Antikörper und ein quantifizierbares Enzym benutzt, um
Proteine zu entdecken. Der Vorteil von ELISA ist, dass die Untersuchung mit Blut und nicht mit
Tumorgewebe gemacht werden kann und daher, wegen der einfacheren Materialgewinnung,
auch wiederholt durchgeführt werden kann. Die Zusammenhänge zwischen den Tumorspezifischen
Markern im Serum (wie HER2) und der effektiven Anzahl von Tumorzellen wird
derzeit diskutiert und ist kontrovers. Es scheint wahrscheinlich, dass eine engere Beziehung
zwischen Serumspiegel und Tumorgrösse als zwischen Serumspiegel und Tumorexpression eines
Markers besteht. Deshalb wird der ELISA-Test eher für die Messung von Tumormarkern wie z.B.
PSA zur Kontrolle eines Krankheitsverlaufs angewandt, als für die Erkennung von Tumoren,
welche grosse Mengen von Markern exprimieren.
In-situ Hybridisierung
In-situ Hybridisierung (ISH) ist eine Technik, die angewandt wird, um bestimmte Nukleinsäuren-
Sequenzen im Gewebe, in Zellen oder in Chromosomen nachzuweisen. Bei dieser Methode
werden Nukleinsäure-Proben verwendet, welche eine ganz bestimmte Nukleotid-Sequenz
aufweisen, die in der Lage sind, sich spezifisch an komplementäre Nukleotid-Sequenzen in der
DNA oder RNA zu binden (oder hybridisieren). Die Probe enthält eine Erkennungssubstanz,
welche die Lokalisierung der gesuchten Nukleinsäure ermöglicht. ISH-Lokalisierung wird im
Allgemeinen durch fluoreszierende Marker (Fluoreszenz in-situ Hybridisierung, FISH) und mit
der Fluoreszenz-Mikroskopie, sowie mit chromogenen (farbproduzierenden) Markern
(chromogene in-situ Hybridisierung, CISH) und einem Hellfeld-Mikroskop erreicht. Die ISH-
Resultate werden verwendet, um das Vorkommen oder Fehlen von Genen, die Amplifizierung
eines Gens oder die Umstrukturierung von Chromosomen (Translokation) zu ermitteln. Es
handelt sich also um eine sehr wertvolle Technik in der Diagnostik von Genen, die in der
Krebsentstehung eine Rolle spielen (Onkogene).
FISH
FISH bedient sich fluoreszierender Marker, welche einer Probe beigefügt werden, die sich an
das entsprechende Gen bindet. Mit Hilfe des Fluoreszenz-Mikroskops werden die Lokalisation
der Gene sowie die Anzahl der vorhandenen Kopien ermittelt. Bei der Anwendung von
verschieden gefärbten Fluoreszenz-Markern und von zwei oder mehr Proben zum gleichen
Zeitpunkt, können verschiedene Hybridisierungssignale entsprechend ihrer unterschiedlichen
Färbung unterschieden werden. Diese Technik ist hilfreich beim Vergleich der Anzahl
verschiedener Zielobjekte in einer Zelle, zum Beispiel der Anzahl von Genen und
Chromosomen, welche ein bestimmtes Gen enthalten. So weisen zum Beispiel ungefähr 20%
der Patientinnen mit Brustkrebs mehrere Kopien des HER2 Gens auf (das bedeutet, das Gen
wird amplifiziert) (Abbildung 5.6). Andere Brustkrebs-Zellen weisen wieder multiple Kopien des
Chromosoms 17 auf (Aneuploidie), auf dem das HER2-Gen lokalisiert ist, wobei jedes
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