Biologische Therapien und Krebs - the European Oncology Nursing ...

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und Chemie einbezieht. Dieses Verfahren kann für die Analyse des Expressionsgrades von
Proteinen in einem Gewebe verwendet werden.
IHC ist eine relativ einfache Methode, bei der eine Vielzahl allgemein gebräuchlicher
Reagenzien und Fixiermittel benützt werden, und kann an frischem, gefrorenem und
konserviertem Gewebe angewendet werden. Bei dieser Technik wird ein Antikörper verwendet,
der spezifisch ist für ein bestimmtes Antigen, zum Beispiel HER2. Für IHC-Testmethoden wurde
eine Vielzahl von Mäuse-Antikörpern produziert mit dem Ziel, den Antikörper zu identifizieren,
der genauestens unterscheidet zwischen Patienten, die ein spezifisches Antigen besitzen oder
nicht. Der Antikörper ist oft mit Fluoreszenzfarbe, radioaktiv oder mit einem Enzym wie zum
Beispiel Peroxidase markiert. Im letzten Fall wird das Gewebe, das typischerweise in Paraffin
eingebettet ist, mit dem passenden Antikörper, der mit Peroxidase markiert ist, inkubiert. Der
bestimmte Antikörper findet das Antigen im Tumorpräparat und bindet sich daran. Die Probe
wird dann mit einer chemischen Substanz (Diaminobenzidin, DAB) in der Gegenwart von
Wasserstoffperoxyd bearbeitet und es entsteht eine blickdichte Ablagerung, welche
mikroskopisch sichtbar gemacht werden kann (DAB-Methode). Alternativ kann auch die
Peroxidase-Antiperoxidase Methode (PAP) benützt werden. Das Endresultat ist eine
Gewebeprobe, die gefärbte und ungefärbte Zellen aufweist.
Die Interpretation von solchen durch IHC gefärbten Proben ist oft qualitativ und abhängig vom
Prozentsatz der für das bestimmte Antigen positiv gefärbten Zellen, sowie von der Intensität der
Färbung. Die Interpretation kann so auch zwischen verschiedenen Untersuchern variieren. Als
Beispiel sei hier der üblicherweise für HER2-Überexpression angewandte Test DAKO
HercepTest ® erwähnt. Bei diesem wird eine Beurteilungsskala von 0 bis 3+ angewandt. 0 und
1+ bezeichnen eine Gradierung, die normalerweise keine Färbung oder nur wenige, schwach
gefärbte Zellen aufweist, während bei 3+ die Mehrheit der Zellen stark gefärbt ist
(Abbildung 5.5). Tatsächlich gibt es aber zwischen den Pathologen und den Labors
Unterschiede in der Bestimmung der Stufe 2+, wegen der subjektiven Einschätzung des
Auswertungssystems.
0
1+
IHC ist eine relativ
einfache Methode,
bei der eine
Vielzahl
allgemeingebräuchlicher
Reagenzien und
Fixiermittel
benützt
werden . . .
2+
3+
IHC Images courtesy of MJ Kornstein, MD, Medical College of Virginia
Abbildung 5.5. Beispiel von Zellmembran-Färbungen für HER2 mit IHC mit der entsprechenden
Auswertung (Scores).
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