Biologische Therapien und Krebs - the European Oncology Nursing ...

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Kürzlich wurde auch die auf kapillarer und ultradünner Elektrophorese basierende
Sequenzierung entwickelt. Beide Methoden erhöhen die Rate der Fragment-Trennung. Mit einer
gellosen Sequenzierungstechnologie der dritten Generation erhofft man sich eine effizientere
Arbeitsweise und erwartet, dass sie bei der Sequenzierung des menschlichen Genoms
angewandt werden kann.
Nukleinsäure-Hybridisierung
Die Information der DNA-Sequenz ist ebenfalls hilfreich, weil sie die Generierung einer
Hybridisierungsprobe speziell für eine bestimmte Sequenz erlaubt. Nukleinsäuren-
Hybridisierung entspricht einer Technik, die die präzise Lokalisation von DNA (Southern Blot)
oder RNA (Northern Blot) mit Hilfe einer Probe erlaubt (Abbildung 5.2). Die Hybridisierung ist
wichtig für verschiedene diagnostische Zwecke, welche weiter unten besprochen werden.
Das Klonen von Genen
Ein Klon ist eine Gruppe von identischen Genen, Zellen oder Organismen, die vom selben
Vorläufer abstammen. Die Fähigkeit, Gene zu klonen, hat weitgehende Einflüsse auf die
Forschung. Das Klonen von Genen besteht aus der Isolation spezieller DNA-Segmente von
ihrem Wirtorganismus und deren Vermehrung (Amplifizierung) im gleichen oder einem
Inkubation
Die komplementäre (ergänzende)
Einzelstrang-Probe ist radioaktiv markiert
AGCCA
TGTGC
ACACG
TCGGT
Einzelstrang-DNA, getrennt und
immobilisiert an einer Membran
AGCCA
TCGGT
TGTGC
ACACG
Die Probe wird hybridisiert (gekreuzt)
mit der immobilisierten,
komplemetären DNA auf der Membran
Radioaktive Signale auf einem Röntgenfilm
werden mit Autoradiographie erkannt
Röntgenfilm
Die DNA-Fragmente werden als
Bänder auf einem Film sichtbar gemacht
Abbildung 5.2 Nukleinsäuren-Hybridisierungstechnik.
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