Identifizierung und Charakterisierung von potentiellen ...

Diskussion 98
„twitching motility“-Fähigkeiten verliert [Coil & Anne, 2009], kann darauf hindeuten, dass es
hier eventuell zu einer Expression eines unbekannten Gens gekommen ist, welches den
möglichen Wegfall teilweise kompensiert. Ähnliches wird von pililosen Mutanten in der
Biofilm-Anheftung berichtet. Durch den Wegfall bestimmter Pilusbestandteile kommt es zu
einer Überexpression unbekannter Faktoren, wodurch auch hier der Ausfall wieder
aufgehoben wird [Lucas et al., 2006]. Möglich ist aber auch, dass lediglich eine der beiden an
der Oberfläche von L. pneumophila zu findenden Pili [Stone & Abu Kwaik, 1998] vom
Ausfall oder einer Beeinträchtigung betroffen ist; wahrscheinlich sind das eher die kurzen Pili
(0,1-0,6 µm), da beim Fehlen der langen die Ausbreitung durch „twitching motility“
zumindest bei 37 °C nach Coil & Anne [2009] gänzlich unterbleibt.
Alle diese Aspekte (Fehlen in der flaR - -Mutante, Synthese-Beteiligung am Virulenzfaktor
TypIV-Pilus mit unbekannter Funktion und Struktur, sowie die verringerte Ausbreitung der
flaR - -Mutante beim „twitching motility“-Test) haben PilN zum interessantesten und
vielversprechendsten Kandidaten für die Weiterbearbeitung gemacht.
6.2.4 FlaR als Regulatorprotein und die mögliche Verbindung zum TypIV-Pilus
Aufbau
FlaR gehört zur Familie der „LysR-type transcriptional regulators“ (LTTR), die in nahezu
allen Bakteriengattungen vorkommen und dort die Transkription von Operons, Regulons und
Promotoren aktivieren oder reprimieren, die in vielfältigen zellulären Funktionen impliziert
sind [Zaim & Kierzek, 2003; Schell, 1993]. Positive Regulation wird von LTTR aus E. coli
oder Erwinia spp. berichtet, die die Expression von Genen, notwendig für die Flagellierung,
Motilität und Chemotaxis, kontrollieren [Maddocks & Oyston, 2008]. Neben dieser positiven
Regulation durch die LTTR kommt es auch noch zu einer negativen Regulation anderer
Transkriptionsregulatoren, die alle in einem komplexen Regulationsnetzwerk eingebunden
sind.
Maddocks & Oyston beschreiben die klassische LTTR-Box, also die Nukleotid-Abfolge, die
von den Regulatoren erkannt und gebunden wird, als TTA-N 7/8 -TAA. Weniger stringent wird
auch oftmals die Sequenz T-N 11 -A als Erkennungsmotiv angegeben, die aber auch noch in
Basenkomposition und -länge variieren kann. Die regulatorische Bindestelle befindet sich
dabei gewöhnlich ca. -35 oder -65 Bp stromaufwärts relativ zum Transkriptionsbeginn des
jeweiligen Gens bzw. Operons. Allerdings finden sich auch Bindestellen bis hin zu -218 Bp
und interne Bindestellen bis +350 Bp von der Promotorregion entfernt [Viswanathan et al.,
2007; Wilson et al., 1995], unter anderem nachgewiesen durch DNase I-Protektionsversuche.