Identifizierung und Charakterisierung von potentiellen ...

Weitere Magazine

Empfehlungen

Info

Material 32 3.3.7 Lösungen und Puffer für die PCR und die RT-PCR • 20 µl Ansatz: PCR-Reagenzien 10-fach Puffer + 25 mM MgCl 2 DNA-Polymerase (5 U/µl) dNTP-Mix (2 mM) ddH 2 O Primer, rückwärts (3 pmol/µl) Primer, vorwärts (3 pmol/µl) Menge 2 µl (2,5 mM MgCl 2 final) 0,1 µl (0,5 U final) 2 µl (0,2 mM final) abhängig von der DNA-Konzentration 2 µl (0,3 µM final) 2 µl (0,3 µM final) DNA-Vorlage konzentrationsabhängig; Ziel: 50-100 ng/20 µl • 20 µl Ansatz: RT-PCR-Reagenzien Menge ddH 2 O abhängig von der cDNA-Konzentration 2x Fast SYBR ® Green Master Mix 10 µl Primer, vorwärts (3 pmol/µl) 2 µl (0,3 µM final) Primer, rückwärts (3 pmol/µl) 2 µl (0,3 µM final) cDNA-Vorlage konzentrationsabhängig; Ziel: 20-50 ng/20 µl 3.3.8 Puffer für die Aufreinigung rekombinanter Proteine an einer FPLC • Lysepuffer Histidin-Fusionsproteine: 50 mM NaH 2 PO 4 , 300 mM NaCl, 10 mM Imidazol, 1 mg/ml Lysozym, Protease-Inhibitor, pH 7,5. • Waschpuffer Histidin-Fusionsproteine: 50 mM NaH 2 PO 4 , 300 mM NaCl, 20 mM Imidazol, pH 7,5. • Elutionspuffer Histidin-Fusionsproteine: 50 mM NaH 2 PO 4 , 300 mM NaCl, 250 mM Imidazol, pH 7,5. • Lysepuffer GST-Fusionsproteine: 140 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 10 mM Na 2 HPO 4 , 1,8 mM KH 2 PO 4 , pH 7,0 (1-fach PBS). • Waschpuffer GST-Fusionsproteine: 1-fach PBS. • Elutionspuffer GST-Fusionsproteine: 50 mM Tris/HCl, 10 mM reduziertes Glutathion, pH 7,5. • PreScission-Proteasepuffer: 50 mM Tris/HCl, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, pH 7,0.
Material 33 • Proteinpuffer: A: 20 mM HEPES, 200 mM NaCl, pH 6,5 B: 20 mM HEPES, 200 mM NaCl, pH 7,0 C: 20 mM MES, 200 mM NaCl, pH 6,5 D: 20 mM Tris, 200 mM NaCl, pH 7,5
Seite 1 und 2: Aus dem Institut für Biochemie der
Seite 3 und 4: Inhaltsverzeichnis I I ZUSAMMENFASS
Seite 5 und 6: Inhaltsverzeichnis III 4.8 Aufreini
Seite 7 und 8: Zusammenfassung 1 I Zusammenfassung
Seite 9 und 10: Einleitung 3 II Einleitung 2.1 Das
Seite 11 und 12: Einleitung 5 2.1.1 Vorkommen, Diagn
Seite 13 und 14: Einleitung 7 Institut (RKI) übermi
Seite 15 und 16: Einleitung 9 MOMP bindet den Komple
Seite 17 und 18: Einleitung 11 Inzwischen sind über
Seite 19 und 20: Einleitung 13 Moleküle (sog. Autoi
Seite 21 und 22: Einleitung 15 Abweichend von der du
Seite 23 und 24: Einleitung 17 Erreger der Legionär
Seite 25 und 26: Einleitung 19 Weiterhin ist bekannt
Seite 27 und 28: Einleitung 21 Eine Legionella-Pilin
Seite 29 und 30: Einleitung 23 komplexen Strukturen,
Seite 31 und 32: Einleitung 25 Hier noch ein Hinweis
Seite 33 und 34: Material 27 3.1.4 Plasmide Zum Eins
Seite 35 und 36: Material 29 • Legionella-Suppleme
Seite 37: Material 31 3.3.4 Lösungen für MA
Seite 41 und 42: Methoden 35 Brutschrank bei 37 °C
Seite 43 und 44: Methoden 37 4.3.1 Polyacrylamid-Gel
Seite 45 und 46: Methoden 39 4.3.4 Färben und Entf
Seite 47 und 48: Methoden 41 Der Gradient erstreckt
Seite 49 und 50: Methoden 43 • 12 Std. oder ü/N b
Seite 51 und 52: Methoden 45 Denaturierung, Anlageru
Seite 53 und 54: Methoden 47 Verhältnis der Absorpt
Seite 55 und 56: Methoden 49 • 0,8 µl dNTP-Mix (1
Seite 57 und 58: Methoden 51 4.8 Aufreinigung rekomb
Seite 59 und 60: Methoden 53 Flussgeschwindigkeit du
Seite 61 und 62: Methoden 55 4.9.3 Datenaufnahme am
Seite 63 und 64: Ergebnisse 57 Um keine Wachstumspha
Seite 65 und 66: Ergebnisse 59 5 6 7 8 1 3 4 Wildtyp
Seite 67 und 68: Ergebnisse 61 1 2 3 4 5 Wildtyp fli
Seite 69 und 70: Ergebnisse 63 aufgetrennte Gel ist
Seite 71 und 72: Ergebnisse 65 Pfeilenummer im Gelbi
Seite 73 und 74: Ergebnisse 67 Abb. V.8 Fraktionspro
Seite 75 und 76: Ergebnisse 69 beiden markierten Pea
Seite 77 und 78: Ergebnisse 71 vom CsrA oder das Yhb
Seite 79 und 80: Ergebnisse 73 Abb. V.15 Auftrennung
Seite 81 und 82: Ergebnisse 75 geringer Konzentratio
Seite 83 und 84: Ergebnisse 77 Vektor/insert E. coli
Seite 85 und 86: Ergebnisse 79 ein Durchschnittswert
Seite 87 und 88: Ergebnisse 81 a) b) Abb. V.23 Optim
Seite 89 und 90:
Ergebnisse 83 5.5 Real-Time-PCR-Ana
Seite 91 und 92:
Ergebnisse 85 Hauptursache für die
Seite 93 und 94:
Diskussion 87 VI Diskussion Legione
Seite 95 und 96:
Diskussion 89 Die Auswertung der Ma
Seite 97 und 98:
Diskussion 91 Färbung der Proteine
Seite 99 und 100:
Diskussion 93 Publikationen zwar ü
Seite 101 und 102:
Diskussion 95 Mit der PF-2D konnten
Seite 103 und 104:
Diskussion 97 Überleben der Mikroo
Seite 105 und 106:
Diskussion 99 Im Legionella pneumop
Seite 107 und 108:
Diskussion 101 würde die Expressio
Seite 109 und 110:
Diskussion 103 auf der Vorhersage d
Seite 111 und 112:
Diskussion 105 Die Aufreinigung und
Seite 113 und 114:
Anhang 107 Nr. Nummer OD optische D
Seite 115 und 116:
Anhang 109 Hilfsbereitschaft Dank.
Seite 117 und 118:
Anhang 111 Benson, R.F. & Fields, B
Seite 119 und 120:
Anhang 113 Comolli, J.C., Hauser, A
Seite 121 und 122:
Anhang 115 Gao, L.Y., Susa, M., Tic
Seite 123 und 124:
Anhang 117 Jepras, R.I., Fitzgeorge
Seite 125 und 126:
Anhang 119 Lubman, D.M., Kachman, M
Seite 127 und 128:
Anhang 121 Petermann, N., Hansen, G
Seite 129 und 130:
Anhang 123 Spirig, T., Tiaden, A.,
Seite 131:
Anhang 125 Woods, A.H. & O'Bar, P.R
Alle anzeigen

Identifizierung und Charakterisierung von potentiellen ...

Erfolgreiche ePaper selbst erstellen

Template löschen?

Als Template speichern?