Identifizierung und Charakterisierung von potentiellen ...

Diskussion 101
würde die Expression des eigentlich erst in der stationären Phase aktiv werdenden pilN-Gens
in der exponentiellen Phase etwas relativieren.
Wird davon ausgegangen, dass pilN korrekterweise vervielfältigt wurde und es zu keiner
Kreuzreaktion mit einem anderen Ziel-Produkt aus der isolierten Gesamt-RNA gekommen ist,
dann ist keine Abweichung von pilN in der flaR - -Mutante im Vergleich zum Wildtyp
auszumachen. Das wiederum würde bedeuten, dass der LTT-Regulator FlaR zumindest nicht
alleinig auf genetischer Ebene eine direkte positive Regulation auf das pil-Operon (pilMpilQ)
hat. Möglich wäre entweder ein weiteres unbekanntes Regulatoprotein oder eine posttranskriptionale
Regulation, ähnlich wie beim CsrA und LetA/S-System [Rasis & Segal,
2009], mit noch unentdeckten weiteren Faktoren und Regulationsproteinen.
6.3.2 Beurteilung der „Twitching motility“-Tests
Wie bereits in Kap. 6.2.3 angeführt, lässt die flaR - -Mutante eine verringerte
flagellenunabhängige Fortbewegung über die Kohle-Agarplatten erkennen (s. auch Kap.
5.6.1). Unter dieser als “twitching motility” bezeichneten Motilität versteht man eine spezielle
TypIV-Pili-vermittelte Form der bakteriellen Fortbewegung, die eine zittrige, ruckartige
Bewegungsweise beschreibt. In vivo nutzen Bakterien diese Art für gewöhnlich dazu, neue
Oberflächen mit hohem Nahrungsaufkommen zu besiedeln [Mattick, 2002].
Um die mögliche Pililosigkeit zusätzlich zur Proteom-Analyse, die bei der flaR - -Mutante ein
PilN-Fehlen offenbart hat, in einem weiteren Experiment zu überprüfen, bietet sich der
„twitching motility“-Test an. PilN ist zumindest bei P. aeruginosa ein essentieller Bestandteil
der bei L. pneumophila unter anderem für die Fortbewegung mitverantwortlichen TypIV-Pili.
Denn ohne PilN lassen sich die so mutierten Gram-negativen Pseudomonaden nicht mehr
vom PO4-Phagen, die die Bakterien einzig über die Pili infizieren, befallen [Martin et al.,
1995]; s. dazu auch Kap. 2.3.1.
Dass die flaR - -Mutante hier nun verringerte „twitching motility“ erkennen lässt, kann
mehrere, in Kap. 6.2.3 aufgezählte Gründe haben. Insgesamt bestätigt dieser Versuch den
durch Proteom-Analyse in der L. pneumophila Corby flaR - -Mutante aufgedeckten Mangel an
PilN-Protein bzw. dessen Involvierung in die TypIV-Pili-Biogenese. Das Ergebnis deutet
ebenso an, dass das FlaR-Regulationsprotein der LTTR-Familie in die Regulation einer der
beiden bei Legionellen aufzufindenden Pili-Arten an der Zelloberfläche in noch nicht gänzlich
verstandener Art und Weise involviert erscheint und genauer untersucht werden sollte.