Métabolisme et fonctions des acides gras oméga-3 à longue chaîne ...

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Table des matières V- Analyse des prostaglandines ........................................................ 74 V-1 Formation de 15-désoxy-Δ 12,14 -PGJ 3 (15dPGJ 3 ) ...................................... 74 V-2 Dosage des prostaglandines par HPLC et détection UV .......................... 74 V-3 Dérivation chimique de la PGD 3 et de la 15dPGJ 3 ................................... 75 V-4 Analyse des prostaglandines par GC-MS ................................................. 76 VI- Protocole animal ......................................................................... 77 VI-1 Animaux et régime alimentaire .............................................................. 77 VI-2 Sacrifices et prélèvement des tissus ....................................................... 79 VI-3 Analyse de la composition en acides gras des phospholipides des tissus par chromatographie en phase gazeuse (GC) .................................................. 79 VI-4 Dosage des adipokines dans le plasma et les tissus adipeux ................. 81 VII- Analyse statistique .................................................................... 81 Résultats .............................................................................................. 82 I - Etude in vivo .................................................................................. 82 I.1 Masses corporelles des souris ..................................................................... 83 I.2 Incorporation du DHA dans le foie, le cœur et les tissus adipeux blancs .. 84 I.3 Effet d’une alimentation enrichie en DHA sur la sécrétion d’adipokines . 92 I.4 Contenu en adipokines des tissus adipeux blancs ...................................... 93 I.5 Effet d’une alimentation enrichie en EPA ou EPA/DHA sur la sécrétion d’adipokines ..................................................................................................... 95 I.6 Discussion-Conclusion ............................................................................... 97 II - Etude in vitro : Adipocytes 3T3-L1 ......................................... 101 II.1 Effets du DHA et de l’EPA sur les adipocytes 3T3-L1 ......................... 101 II.1-1 Analyse de l’incorporation du DHA et de l’EPA dans les phospholipides membranaires des cellules .............................................................................................. 101 II.1-2 Effet du DHA et de l’EPA sur la sécrétion d’adiponectine par les adipocytes 3T3- L1 ................................................................................................................................... 104 II.2 Effets de divers triènes conjugués sur les adipocytes 3T3-L1 ................ 106 II.2-1 Effet de la PDX sur la sécrétion d’adiponectine par les adipocytes 3T3-L1 ....... 107 9
Table des matières II.2-2 Effets de molécules ayant une géométrie du triène conjugué différente de celle de la PDX sur la sécrétion d’adiponectine par les adipocytes 3T3-L1 ............................... 108 II.2-2.a) Géométrie Z,E,E : Leucotriène B 4 (LTB 4 ) ............................................................... 108 II.2-2.b) Géométrie E,E,E : 5(S),12(S)-diHETE .................................................................... 110 II.2-3 Effets de molécule ayant une géométrie du triène conjugué similaire de celle de la PDX : le 8(S),15(S)-diHETE, sur la sécrétion d’adiponectine par les adipocytes 3T3-L1. ........................................................................................................................................ 111 II.3 Effets de métabolites oxygénés dérivés de l’EPA sur les adipocytes 3T3- L1 ................................................................................................................... 112 II.3-1 Synthèse de 15dPGJ 3 à partir de PGD 3 commerciale .......................................... 113 II.3-1.a) Mise au point des conditions expérimentales à partir de la PGD 2 commerciale ...... 113 II.3-1.b) Synthèse de 15dPGJ 3 à partir de la PGD 3 commerciale. .......................................... 117 II.3-2 Effets des prostaglandines de la série 3 sur la sécrétion d’adiponectine par les adipocytes 3T3-L1 .......................................................................................................... 121 II.3-2.a) Comparaison des effets de la PGD 3 et de la PGD 2 . .................................................. 121 II.3-2.b) Comparaison des effets de la 15dPGJ 3 et de la 15dPGJ 2 ......................................... 122 II.4 Discussion – Conclusion ......................................................................... 123 Conclusion générale & Perspectives .............................................. 126 Références Bibliographiques .......................................................... 130 Annexes ............................................................................................. 160 10
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