Contribution à l'étude de la qualité bactériologique de ... - BEEP

- 64-b - Mode opératoireLa recherche des'salmonelles se fait dans 25 g de produit suivant 4 étapes.b-l - Pré-enrichissementAprès l'ensemencement des différents milieux de culture pour le dénombrementdes germes étudiés plus haut, le reste de la solution mèrerevivifiée est récupéré pour être incubé à 37°C pendant 24 heures. Cetteincubation est d'autant plus nécessaire qu'elle permet la culture dessalmonelles « stressées ».b-2 - EnrichissementPour augmenter les chances finales, l'enrichissement se fait simultanémentsur deux milieux: 0,1 ml et 1 ml de la solution mère pré-enrichiesont mélangés respectivement à 10 ml de Rappaport et Bouillon au Sélénite,tous en tubes. L'incubation se fait à 37°C pendant 24 heures.b-3 - IsolementLes milieux d'isolement (Hektoën et G.V.B.) sont coulés en boîte depétri. Après solidification, ils sont ensemencés en surface.L'ensemencement se fait à l'aide d'une oëse de platine trempée dans lesmilieux enrichis précédemment. Les boîtes de pétri sont incubées pendant24 heures à 37°C. A l'issue de ce délai, les colonies suspectes apparaissentbleuâtres avec ou sans centre noir (production ou non deH 2 S, lactose négatif) sur milieu Hektoën et roses entourées d'une zonerouge sur milieu G.V.B.b-4 - IdentificationL'identification des colonies suspectes peut être facilitée parl'intermédiaire de la galerie API 20 E. Cette dernière contient tous lesmilieux et réactifs nécessaires à l'identification des salmonelles. Lestubes et leur capsule, parfois les tubes seuls, sont remplis avec la coloniesuspecte en suspension dans 5 ml d'eau distillée. Après 24 hd'incubation à 37°C, a lieu la lecture, ainsi que l'identification. La lectureet l'identification se font à l'aide d'un catalogue analytique.A défaut de la galerie API 20 E, l'identification des salmonelles se faiten recherchant les caractères biochimiques de ces germes d'oùl'utilisation des milieux suivants.