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guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

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APPENDICE 1: Tecniche <strong>di</strong> allevamento d<strong>ei</strong> collemboli<br />

1 - Metodo proposto nella ISO 11267:1999<br />

Substrato <strong>di</strong> allevamento<br />

Ut<strong>il</strong>izzare gesso <strong>di</strong> Parigi (gesso <strong>per</strong> stucco, pH 6,4) e carbone attivo (carbone<br />

attivo polverizzato con pH tra 6 e 7), miscelati in rapporto 8:1 (eventualmente<br />

anche in rapporto <strong>di</strong> 9:1 o 10:1). In relazione al tipo <strong>di</strong> gesso, aggiungere<br />

60÷100 g <strong>di</strong> acqua a 100 g <strong>di</strong> miscela. L’acqua aggiunta consente una elevata<br />

umi<strong>di</strong>tà del <strong>su</strong>bstrato mentre <strong>il</strong> carbone assorbe i gas prodotti dalle feci. Inoltre,<br />

essendo F. can<strong>di</strong>da pressoché bianca, la colorazione nera <strong>di</strong> fondo fac<strong>il</strong>ita le<br />

osservazioni.<br />

La presenza <strong>di</strong> umi<strong>di</strong>tà <strong>su</strong>lla <strong>su</strong><strong>per</strong>ficie del <strong>su</strong>bstrato è essenziale <strong>per</strong> la<br />

sopravvivenza e la crescita d<strong>ei</strong> collemboli. Il pH può essere fac<strong>il</strong>mente<br />

determinato impiegando in<strong>di</strong>catori <strong>di</strong> pH posti <strong>di</strong>rettamente <strong>su</strong>lla <strong>su</strong><strong>per</strong>ficie<br />

umida.<br />

Contenitori <strong>di</strong> allevamento<br />

Ut<strong>il</strong>izzare contenitori in plastica <strong>di</strong> volume pari a 400 mL. Riempire i contenitori<br />

con uno spessore <strong>di</strong> circa 1 cm <strong>di</strong> <strong>su</strong>bstrato <strong>di</strong> allevamento e aggiungere<br />

eventualmente acqua d<strong>ei</strong>onizzata fino alla saturazione. Il contenuto <strong>di</strong> umi<strong>di</strong>tà<br />

può essere mantenuto pressoché costante attraverso l’ut<strong>il</strong>izzo <strong>di</strong> uno “stoppino”<br />

assorbente imbibito <strong>di</strong> acqua e inserito nel <strong>su</strong>bstrato o attraverso l’aggiunta<br />

<strong>di</strong>retta <strong>di</strong> acqua d<strong>ei</strong>onizzata con l’uso <strong>di</strong> una pipetta. Il <strong>su</strong>bstrato deve essere<br />

saturo ma senza la presenza <strong>di</strong> acqua <strong>su</strong>lla <strong>su</strong><strong>per</strong>ficie.<br />

Chiudere <strong>il</strong> contenitore <strong>di</strong> allevamento ut<strong>il</strong>izzando un co<strong>per</strong>chio ed aerare<br />

<strong>per</strong>io<strong>di</strong>camente (in combinazione con l’aggiunta <strong>di</strong> cibo) togliendo <strong>il</strong> co<strong>per</strong>chio<br />

<strong>per</strong> breve tempo.<br />

Se necessario, <strong>il</strong> co<strong>per</strong>chio può essere <strong>per</strong>forato <strong>per</strong> favorire l’aerazione.<br />

Con<strong>di</strong>zioni climatiche<br />

Per <strong>il</strong> mantenimento dell’allevamento è consigliato allestire una camera con<br />

tem<strong>per</strong>atura controllata <strong>di</strong> 20÷22 °C, 70÷80 % <strong>di</strong> umi<strong>di</strong>tà relativa e <strong>il</strong>luminazione<br />

costante <strong>di</strong> 400÷800 lux (o ciclo luce:buio <strong>di</strong> 16h:8h).<br />

Cibo<br />

Sia <strong>per</strong> l’allevamento che <strong>per</strong> i saggi, ut<strong>il</strong>izzare lievito secco in granuli. Fornire<br />

cibo 1 o 2 volte alla settimana. Per evitare l’eccessivo sv<strong>il</strong>uppo <strong>di</strong> funghi e<br />

muffe, fornire <strong>il</strong> cibo in piccole dosi e ad intervalli frequenti.<br />

Trasferimento<br />

Per ottenere nuovi allevamenti è <strong>su</strong>fficiente prelevare alcuni collemboli dagli<br />

allevamenti <strong>di</strong> partenza dopo circa 8 settimane e trasferirli in nuovi contenitori <strong>di</strong><br />

allevamento attraverso l’uso <strong>di</strong> un aspiratore. Il trasferimento in nuovi contenitori<br />

solitamente induce la deposizione delle uova.<br />

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