guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

l’ambiente e quindi vanno segnalati nel rapporto di prova, esprimendo
comunque il valore di EC50 ottenuto.
Espressione dei risultati
I risultati dei saggi vengono espressi come EC50 24 h o 48 h, approssimando i
valori percentuali calcolati alla prima cifra decimale.
Campo di prova EC50: valori compresi tra 100 e 0,1. (i valori di EC50 inferiori a
0,1 vengono approssimati a 0,1).
Nella espressione del risultato del parametro EC50 verranno dati come stima
dell’incertezza di misura i limiti fiduciari derivanti dall’analisi dei probits.
Nel rapporto di prova verranno indicati inoltre:
- l’origine e l’età degli allevamenti di Daphnia magna (riportare la data
corrispondente alla schiusa degli efippi);
- eventuali trattamenti del campione quali filtrazione, congelamento ecc.;
- la sensibilità al bicromato di potassio espressa come EC50 24 h.
APPENDICE 1: Allevamento di Daphnia magna
Acqua di allevamento
Acque naturali con pH di 7,8 + 0,2 e durezza di 250 mg/L + 25 mg/L (espressa
come CaCO3) possono essere utilizzate per la coltura.
In alternativa può essere utilizzata l’acqua di diluizione preparata come
precedentemente descritto.
Conservare a 20 + 2°C per 15 giorni
Analisi chimiche sull’acqua di allevamento
Per verificare che l’acqua di allevamento risponda ai requisiti richiesti, viene
effettuato preventivamente il controllo dei parametri chimici. Tale verifica dovrà
venir effettuata ogni qualvolta si apportino dei cambiamenti nella composizione
dell’acqua stessa o si evidenzino delle anomalie negli allevamenti.
Condizioni chimico-fisiche
L’allevamento di Daphnia magna deve essere mantenuto a 20 ± 2°C, con
illuminazione di 1.000 lux circa, con fotoperiodo di 16 ore di luce e 8 di buio, con
insufflazione di aria mediante diffusori, tale da garantire una concentrazione di
ossigeno disciolto superiore a 7 mg/L.
Allestimento e mantenimento della coltura
È consigliabile allestire l’allevamento secondo le seguenti modalità:
- introdurre in cristallizzatori acqua di allevamento e Daphnia magna
Straus in quantità tale da avere una densità di adulti non superiore a 100
individui/L;
- aerare e mantenere alle condizioni chimico fisiche citate;
- alimentare con l’alga verde unicellulare Selenastrum capricornutum
(Psudokirchneriella subcapitata secondo la nuova nomenclatura) e con il
lievito Saccharomyces cerevisiae. La somministrazione va effettuata in
modo da garantire una quantità giornaliera di circa 300.000 cellule/mL
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