guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

Nota: Per ottenere informazioni ulteriori per la determinazione del range di concentrazioni da
adottare nel saggio finale, la durata del saggio preliminare può essere estesa a 4 settimane. Ciò
consente di supporre, attraverso una valutazione qualitativa, gli effetti delle concentrazioni
testate sulla riproduzione.
Saggi finali
Le concentrazioni da utilizzare nei saggi finali vengono individuate in relazione
ai risultati ottenuti dai saggi preliminari o da dati di tossicità. Le sostanze non
devono essere testate a concentrazioni superiori a 1000 mg/kg di massa secca
di suolo artificiale.
Per ogni concentrazione, miscelare le sostanze in esame con il suolo artificiale
come descritto in precedenza e disporre in ogni contenitore del saggio (definito
replica) circa 30 g di suolo artificiale secco. Evitare di comprimere il suolo per
facilitare gli spostamenti dei collemboli nel contenitore. Per ciascuna
concentrazione e per il controllo devono essere preparate 5 repliche.[CJ9] Se
l’approccio scelto è l’individuazione del valore di ECx, preparare almeno 2
repliche per ciascuna concentrazione e 5 per il controllo. Per la misura del pH e
dell’umidità del suolo artificiale, viene raccomandata la preparazione di
contenitori addizionali per ciascuna concentrazione e per il controllo.
All’inizio del saggio e dopo un periodo di 14 giorni, aggiungere circa 2 mg di
lievito secco in granuli a ciascun contenitore e coprire nuovamente il contenitore
(con un coperchio in plastica o un disco in vetro o con parafilm). Aprire i
contenitori per breve tempo due volte alla settimana per l’aerazione.
Determinare il contenuto in acqua e il pH (con soluzione 1 mol/L di KCl) del
suolo artificiale all’inizio e alla fine del saggio. Quando vengono saggiate
sostanze acide o basiche, il pH non deve essere corretto.
Dopo due settimane, controllare il contenuto in acqua ripesando i contenitori
addizionali e compensare la perdita di acqua, se questa eccede il 2% del
contenuto iniziale di acqua.
Determinazione dei collemboli sopravvissuti
Il saggio prevede il conteggio del numero di collemboli dopo 4 settimane
dall’introduzione degli stessi nei [CJ10]contenitori dei saggi e nel controllo. La
procedura prevede di versare il suolo artificiale di ogni replica in contenitori di
500-600 mL di capacità, aggiungere acqua e miscelare delicatamente la
sospensione con una spatola. Attraverso questa operazione i collemboli,
galleggiando sulla superficie dell’acqua, possono essere facilmente contati. Il
saggio prevede di contare gli adulti e i giovani, quando presenti, attraverso una
procedura illustrata nell’Appendice 2 e riportarne il numero.
Nota: possono essere impiegati altri metodi di estrazione dopo aver appurato la loro efficacia.
97