guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

3.3.3 Saggio di tossicità con Daphnia magna
Principio del metodo
Il metodo consente di determinare l’inibizione della mobilità della Daphnia
magna Straus (Cladocera, Crustacea). Viene valutata la concentrazione del
campione che immobilizza il 50% degli organismi testati dopo 24 h ed
eventualmente dopo 48 h (EC50 24 h; EC50 48 h).
Il metodo si applica a matrici acquose (effluenti industriali ed urbani, acque di
superficie e sotterranee) e ad estratti acquosi di matrici solide (suoli, sedimenti).
Conservazione e preparazione del campione
- Il saggio di tossicità deve essere eseguito nel più breve tempo possibile,
entro le 6 h che seguono il prelevamento. Se questi tempi non possono
essere rispettati raffreddare il campione a 4 ± 3°C dal momento del prelievo
e analizzare il campione nelle 48 h seguenti;
- nel caso in cui il saggio non possa essere iniziato entro le 48 h dal prelievo
il campione deve essere congelato e può essere testato nei due mesi
successivi al campionamento;
- si preleva un’aliquota di circa 150 mL;
- nel caso siano presenti solidi galleggianti, si effettua una filtrazione
dell’aliquota, mediante setaccio a maglie di 1 mm circa.
Materiali, reagenti e apparecchiature
- Cristallizzatori in vetro borosilicato;
- recipienti da 50 o 100 mL in vetro borosilicato o plastiche fluorurate;
- pipette graduate in vetro o in plastica “monouso” da 1, 2, 5, 10, 25 mL;
- pipette in vetro con diametro interno da 3 a 5 mm provvisti di tettarelle;
- cilindri in vetro da 50-250-500 mL;
- beute in vetro da 1-2-3 L;
- tubo in plastica;
- tappi in gomma per beute con due fori;
- reagenti chimici per la preparazione del mezzo di coltura per alghe e per
l'acqua di allevamento/diluizione;
- termometro per la misurazione della temperatura ambientale;
- sistema di illuminazione tale da consentire al piano di lavoro una
luminosità di circa 1.000 lux e 4.000 lux;
- sistema di termoregolazione atto al mantenimento della temperatura
nell’ambito di 20 ± 2°C;
- temporizzatore per la regolazione del fotoperiodo;
- luxmetro;
- pHmetro;
- ossimetro;
- setaccio a maglie di circa 1 mm per la separazione di materiale in
sospensione nel campione;
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