guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

4.1 INDICI DI QUALITÀ AMBIENTALE CON I NEMATODI
I nematodi vivono in ogni centimetro cubo di suolo o di sedimento, si
estraggono facilmente e perciò non è difficile disporre di un campione
significativo per ogni tipo di ambiente, da quello più intatto a quello più
inquinato. L’analisi nematologica richiede tuttavia una certa preparazione
tecnica, facile da raggiungere, ed una capacità di riconoscimento delle forme
che invece è molto impegnativa da acquisire a livello di genere o specie, ma
non difficile a livello di riconoscimento dei gruppi tassonomici elevati (classi,
sottoclassi, famiglie).
Prelievo del suolo
L’analisi nematologica di un ettaro di terreno richiede il prelievo (carotaggi), da
alcune decine di punti diversi, di altrettanti piccoli campioni di suolo (solitamente
fino a 10-15 cm di profondità) di poche decine di mL ciascuno. Tutto il materiale
così raccolto va mescolato insieme (accuratamente) per alcuni minuti allo scopo
di ottenere il campione rappresentativo dal quale estrarre i nematodi. Il suolo
raccolto non va tenuto al sole, non deve seccare, ma deve essere conservato al
fresco e trattato per l’estrazione dei nematodi quanto prima (entro pochi giorni
dal prelievo sul campo).
Vi sono vari metodi di estrazione e di montaggio in vetrino. Le metodiche qui
proposte sono forse le migliori quanto al rapporto efficienza/sforzo.
Estrazione dei nematodi
Estrazione con Ludox
Questo metodo è particolarmente indicato per estrarre i nematodi dai sedimenti
d’acqua dolce (laghi, ruscelli e fiumi).
Disponendo di una soluzione di silice colloidale Ludox, è sufficiente raccogliere
campioni anche piccoli (meno di 100 mL di sedimento) dai quali si otterranno
nematodi con un minimo di detrito e di sporco. A seconda del tipo di substrato,
si può decidere se procedere o no ad un'eliminazione preventiva della ghiaia e
della sabbia grossolana con un sistema di decantazione simile a quello sopra
descritto.
Successivamente si procede come segue:
1. centrifugare a 2000 giri il sedimento (in 2 tubi Eppendorf da 50 mL) per
pochi secondi;
2. eliminare l'eccesso d'acqua su filtro (∅ 10 cm) da 35 µm per recuperare
eventuali nematodi;
3. aggiungere del Ludox al culotto fino a raggiungere i 45 mL;
4. pesare le Eppendorf a coppie uguagliando i pesi con soluzione di Ludox;
5. tappare e agitare bene per mescolare il sedimento col Ludox;
6. centrifugare per 6 minuti a 2000 giri/minuto;
7. versare il Ludox (con i nematodi) sullo stesso filtro del punto 2;
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