guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

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US-EPA, 1996. Ecological effects test guidelines. OPPTS Earthworm Subchronic Toxicity Test. United States Environmental Protection Agency. Prevention, Pesticides and Toxic Substances (7104). EPA712-C-96-167, April 1996. Van Ewijk P.H. and Hoekstra J.A., 1993. Calculation of the EC50 and its confidence interval when sub-toxic stimulus is present. Ecotox. Environ. Safety 25, 25-32. Van Gestel, C.A.M., van Dis W.A.,. van Breemen E.M and Sparenburg P.M., 1988. Comparison of two methods for determining the viability of cocoons produced in earthworm toxicity experiments. Pedobiologia 32, 367 - 371. Williams D.A., 1972. The comparison of several dose levels with a zero dose control. Biometrics 28, 519-531. Williams D.A., 1971. A test for differences between treatment means when several dose levels are compared with a zero dose control. Biometrics 27, 103-117. 92
3.4.2.2 Saggio di riproduzione di Folsomia candida Principio del metodo Il saggio consente di determinare gli effetti sulla riproduzione di Folsomia candida provocati da sostanze aggiunte al suolo artificiale in concentrazioni crescenti. Può essere impiegato per valutare e/o comparare gli effetti di trattamenti di rimediazione ed effetti subletali o non tossici di composti chimici. Il metodo non è applicabile a sostanze volatili, sostanze per le quali H (costante di Henry) o il coefficiente del rapporto aria/acqua è maggiore di 1. All’interno del gruppo dei collemboli, Folsomia candida (Willem, 1902) è la specie individuata per i saggi letali e sub-letali (ISO 11267:1999); Sandifer e Hopkin, 1987; Crommentuijn et al., 1993; Crommentuijn et al., 1995; Sandifer e Hopkin, 1996; Hopkin, 1997; Trublaevich e Semenova, 1997; Cortet et al., 2000; Fountain e Hopkin, 2001; van Gestel e Mol, 2003). Onychiurus armatus (Bengtsson et al., 1985; Tranvik et al., 1993), Orchesella cincta (Joosse e Buker, 1979; Joosse e Verhoef, 1983; Nottrot et al., 1987; van Straalen et al., 1987; van Straalen et al., 1989; Posthuma 1990; Posthuma et al., 1992), Isotoma notabilis (Tranvik et al., 1993), Sinella communis (Greenslade e Vaughan, 2003), Tetrodontophora bielanensis (Gräff et al., 1997) ed altre specie di collemboli (Chauvat e Ponge, 2002) vengono impiegate in saggi di laboratorio ma non raggiungono lo stesso livello di routine usato per F. candida. Di seguito viene riportata la procedura del saggio di inibizione della riproduzione di Folsomia candida. Vengono quindi riportati alcuni dei principi del metodo ISO 11267:1999, preparato in accordo con la Technical Committe ISO/TC 190, Soil Quality, Subcommittee SC 4, Biological methods. Animali impiegati nel saggio I collemboli impiegati nel saggio, ottenuti da uova deposte da adulti maturi di F. candida, devono avere un’età compresa tra 10 e 12 giorni. Generalmente, nelle condizioni di controllo, i giovani compaiono dopo 28 giorni. Preparazione del suolo artificiale Il suolo impiegato nel saggio consiste di: suolo artificiale secco di base (definito suolo artificiale in accordo con la norma ISO 11268-1), sostanza da testare e acqua deionizzata. Suolo artificiale base Componenti Torba di sfagno, essiccata all’aria, finemente macinata e senza residui visibili di piante Argilla caolinitica, essiccata all’aria, contenente non meno del 30 % di caolinite Quantitativo, espresso sul % di massa secca 10 20 93
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