guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

- chiudere il sacchetto con l’apposito legaccio e riporre le capsule Petri
per 72 ore in un termostato non ventilato, al buio ed a una
temperatura di 25 + 2 °C. Per evitare che, durante lo sviluppo
dell’apparato radicale, i coperchi delle Petri vengano sollevati, con
possibile aumentata evaporazione e conseguente essiccamento dei
semi, porre un peso sulla capsula Petri superiore di ciascuna pila.
Controllo negativo
Per ciascuna specie preparare un controllo negativo predisponendo 4 capsule
Petri contenenti ciascuna il filtro di carta e 5 ml di acqua ultrapura e procedere
come per i campioni da sottoporre alla prova. Realizzare 3 carte di controllo
per: 1) numero di semi germinati, 2) allungamento radicale, 3) indice di
germinazione percentuale. Scartare l’intera busta di semi e ripetere la prova
ogni volta che il risultato ottenuto per il controllo negativo eccede i limiti di
fiducia al 95% per una o più delle carte di controllo. Inoltre, se necessario,
utilizzare anche un controllo negativo con una adatta matrice solida con
caratteristiche simili.
La Norma ASTM E 1598 – 94 prevede che possano essere impiegati: sabbia di
quarzo lavata; perline di vetro; un suolo naturale di opportuna composizione; un
suolo artificiale “standard”. Il protocollo USEPA (1988; Meier et al., 1997)
prevede invece l’uso di sabbia silicea (20 mesh), che può essere utilizzata
anche per preparare varie diluizioni (0, 25, 50, 75 e 100 %) del campione solido
da testare. La bozza della Norma ISO/CD 17126 (2001) utilizza come mezzo di
crescita sabbia quarzosa lavata fine (dimensioni 0,4 – 0,8 mm) coperta da altra
sabbia più grossolana (0,7 – 1,2 mm o 0,8 – 1,4 mm). Infine, la bozza di una
nuova Guideline OECD (2000) ripropone un protocollo (OECD, 1984) per la
preparazione di un suolo artificiale composto da: 10 % torba di sfagno; 20 %
argilla contenente non meno del 30 % di caolinite; 70 % sabbia quarzosa
industriale: carbonato di calcio (0,3 – 1,0 %) per ottenere un pH iniziale di 6,0 ±
0,5. Anche per i sedimenti (USEPA, 1994) viene proposto di utilizzare un
materiale artificiale, composto da 77 % di sabbia, 17 % di silt/argilla; 5 % di
sostanza organica e 1 % di un opportuno tampone (carbonato di calcio o di
calcio e magnesio).
Determinazioni
Il saggio deve essere effettuato utilizzando semi di tutte e tre le specie indicate:
Cucumis sativus L. (Cetriolo), Lepidium sativum L. (Crescione), Sorghum
saccharatum Mœnch (Sorgo).
Saggio di confronto
Si effettua quando i campioni possono essere sottoposti al saggio tal quali. Il
relativo risultato viene espresso come Indice di Germinazione Percentuale
relativo al controllo negativo. In questo caso non è possibile calcolare una ECx.
Saggio preliminare
Si effettua quando è necessario calcolare una concentrazione efficace ECx di
una matrice ambientale, o di un composto chimico addizionato ad una matrice
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