guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

Parametri chimico-fisici
Per l’esecuzione del saggio algale è necessario conoscere i seguenti parametri
chimici da rilevare durante le fasi del prelievo o in laboratorio.
- pH;
- Salinità: determinabile direttamente come mg/L; oppure come
Conducibilità (µS/cm) o come Cloruri (mg/L di Cl - );
Piano sperimentale
Il piano di lavoro è rivolto alla misura della crescita algale dopo 72 o 96 ore di
incubazione; la crescita algale misurata nel campione viene confrontata con
quella misurata in una soluzione di riferimento (controllo).
Per ogni campione viene predisposto un piano sperimentale con almeno 5
diluizioni ciascuna composta da 3 repliche, in tal caso vengono impiegate 18
beute (15 per le diluizioni del campione e 3 per il controllo). Il numero di repliche
ed il numero di diluizioni hanno carattere indicativo e possono essere modificati
tenendo presente la necessità di disporre almeno di un minimo di 5 diluizioni;
ciascuna costituita da almeno 3 repliche. Tutte le operazione devono essere
eseguite sotto cappa a flusso laminare o comunque in ambiente asettico.
Preparazione del campione
Aggiungere, a 1000 mL di campione filtrato con membrana con pori di diametro
0,45 µm, 1 mL di ciascuna delle soluzioni 1, 2, 3, 4 e 5 descritte in appendice.
Agitare per capovolgimento.
Preparazione della soluzione di riferimento (controllo)
Aggiungere, a 1000 mL di acqua ultrapura filtrata con membrana da 0,45 µm,
1mL di ciascuna delle soluzioni 1, 2, 3, 4 e 5 descritte in appendice. Agitare per
capovolgimento.
Campioni con elevate concentrazioni di nutrienti
La presenza di campioni con elevate concentrazioni di nutrienti (ad esempio
effluenti di impianti di depurazione di tipo civile) rende consigliabile una
riduzione della concentrazione del terreno del 50% rispetto alla coltura di
mantenimento; allo scopo si dovranno aggiungere a 1000 mL di campione e
della soluzione di riferimento 0,5 mL di ciascuna delle soluzioni di nutrienti.
Preparazione delle diluizioni del campione
Utilizzando la procedura prevista nel piano sperimentale, si vengono a costituire
due soluzioni con composizione chimica simile al terreno di mantenimento con
esclusione dell’EDTA. L’esclusione dell’EDTA risulta opportuna al fine di evitare
la riduzione della tossicità esercitata da eventuali metalli tossici in soluzione.
Utilizzare la soluzione di riferimento per la preparazione delle colture di controllo
e per le diluizioni del campione.
Il campione deve essere diluito in una serie di almeno 5 diluizioni espresse in
termini di concentrazione percentuale rispetto al campione tal quale (100%). A
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