guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

I lombrichi selezionati devono essere acclimatati per 1-7 giorni al substrato che
verrà usato per il saggio. Durante questo periodo, i lombrichi devono essere
nutriti con lo stesso cibo che si utilizzerà durante il saggio.
Si preparano 10 lombrichi per ogni contenitore di controllo e di trattamento. I
lombrichi vengono lavati e asciugati e in seguito posizionati su carta assorbente
per un breve periodo, per permettere l’eliminazione dell’acqua in eccesso.
I gruppi di 10 lombrichi devono essere pesati individualmente prima di essere
collocati nei contenitori per l’inizio del saggio. La massa umida dei singoli
lombrichi deve essere tra 300 e 600 mg.
Procedimento
Allestimento dei contenitori e posa dei lombrichi
Vengono preparati almeno quattro contenitori per ogni concentrazione da
esaminare e quattro per il controllo. Subito prima dell’inizio del saggio, si
riempiono i contenitori per il saggio, mescolando il campione da esaminare con
il substrato di base inumidito e poi si pongono sulla superficie i lombrichi pesati.
Si consiglia una quantità di 10 lombrichi in 500-600 g di massa secca di suolo
(cioè 50-60 g di suolo per lombrico). Se si usano quantità maggiori di suolo, il
carico di 50-60 g di suolo per lombrico dovrebbe essere mantenuto,
incrementando il numero di lombrichi.
Per evitare errori sistematici nella distribuzione dei lombrichi nei contenitori,
l’omogeneità della popolazione da testare deve essere determinata mediante
pesata singola di 20 lombrichi, campionati con metodologia random dalla
popolazione da cui verranno estratti quelli per il saggio. Avendo assicurato
l’omogeneità, gruppi di lombrichi sono selezionati, pesati e assegnati ai
contenitori per il saggio usando una procedura random.
I lombrichi in buono stato di salute, normalmente, si interrano subito sotto la
superficie del substrato e, di conseguenza, quelli che rimangono in superficie
dopo 15 minuti possono essere danneggiati e devono essere sostituiti. Se i
lombrichi sono sostituiti, i nuovi lombrichi devono essere pesati in modo da
considerare il peso totale di partenza del contenitore.
I contenitori sono coperti e posti nelle camere del saggio.
Condizioni del saggio
La temperatura del saggio è di 20 ± 2°C. Il saggio è effettuato con cicli
controllati di luce/buio (preferibilmente, 16 ore di luce e 8 di buio) con
illuminazione variabile tra 400 e 800 lux nell’area dei contenitori.
I contenitori non sono aerati durante il saggio. Aprirli una volta la settimana, per
nutrire gli organismi, è considerato sufficiente per permettere gli scambi
gassosi.
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