guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

organismi testati dopo 24 h ed eventualmente dopo 48 h (EC50 24 h; EC50 48
h).
E’ auspicabile che l’intervallo di concentrazioni scelto fornisca almeno tre
percentuali di immobilizzazione comprese tra il 10% e 90%.
Esecuzione e lettura dei saggi
Per ciascuna concentrazione utilizzare un minimo di 20 dafnidi. Predisporre 4
contenitori con 50 mL per ciascuna concentrazione da testare e trasferirvi in
ciascuno 5 dafnidi di età inferiore alle 24 h, con le modalità indicate in
precedenza.
Per ciascuna serie di saggi effettuare un controllo predisponendo 4 contenitori
con 50 mL di acqua di diluizione contenenti ciascuno 5 dafnidi. Leggere i saggi
come descritto per il saggio preliminare.
Controllo ossigeno disciolto
Misurare la concentrazione di ossigeno disciolto (UNI EN 25814: 1994) nel
recipiente corrispondente alla più debole concentrazione in cui si è osservata la
massima inibizione (se necessario riunire in un unico recipiente le aliquote
corrispondenti alla concentrazione da testare), operando con le precauzioni
necessarie per non modificare la concentrazione di ossigeno disciolto.
Controllo della sensibilità di Daphnia magna al dicromato di potassio
Determinare almeno ogni tre mesi la EC50 24 h del dicromato di potassio
utilizzando l’acqua di diluizione per verificare la sensibilità di Daphnia magna,
(esempio di concentrazioni da utilizzare: 3,2 mg/L; 2,7 mg/L; 2,3 mg/L; 1,6
mg/L; 1,0 mg/L; 0,4 mg/L).
La EC50 deve essere compresa tra 0,6 mg/L e 2,1 mg/L. Il valore ottenuto va
menzionato nel rapporto di prova.
Stima, validazione ed espressione dei risultati
Calcolo della EC50
Al termine del periodo di incubazione, conteggiare per ogni concentrazione il
numero di organismi immobili in rapporto al numero totale di dafnie utilizzate.
Calcolare la EC50 con il metodo statistico di analisi dei probits utilizzando il
programma di calcolo Puddu, 1989.
Validità dei risultati
Per considerare validi i risultati, devono essere soddisfatte le seguenti
condizioni:
- la percentuale di immobilizzazione delle dafnie nei controlli deve essere <
10%;
- la EC50 24 h del bicromato di potassio deve essere compresa tra 0,6 mg/L e
2,1 mg/L.
Il tenore di ossigeno disciolto alla fine del saggio dovrebbe essere > 2 mg/L; dal
momento che il campo di applicazione è limitato alle matrici ambientali, valori
inferiori di ossigeno disciolto possono essere essi stessi causa di tossicità per
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