guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

3.4.2.1 Saggio di riproduzione di Eisenia fetida / Eisenia andrei
Principio del metodo
In questo saggio di laboratorio il campione in esame viene aggiunto ad un
terreno artificiale dove vengono posti lombrichi adulti della specie Eisenia fetida
(Savigny, 1826) o Eisenia andrei (Andre, 1963). Dopo 4 settimane di
esposizione sono determinati la mortalità e gli effetti sulla crescita su lombrichi
adulti. Gli adulti sono rimossi dal suolo e gli effetti sulla riproduzione sono
valutati dopo altre 4 settimane, contando la discendenza presente nel suolo. Il
tasso di riproduzione dei lombrichi presenti nel terreno da testare è paragonato
a quello del controllo.
Eisenia fetida/Eisenia andrei sono considerate specie rappresentative dei
lombrichi, informazioni ambientali sull’ecologia dei lombrichi ed il loro uso nella
sperimentazione ecotossicologica sono disponibili in bibliografia.
Attrezzature
Contenitori con capacità variabile tra 1 e 2 litri. I contenitori dovrebbero avere
un’area di sezione trasversale di circa 200 cm 2 in modo che si raggiunga
l’altezza di circa 5-6 cm di substrato umido quando si aggiungono una quantità
equivalente a 500 - 600 g di sostanza secca (s.s). La copertura del contenitore
deve essere tale da permettere lo scambio gassoso tra il substrato e
l’atmosfera e l’accesso della luce, mentre dovrebbe prevenire la fuga dei
lombrichi (per esempio utilizzando una copertura trasparente e forata). Se la
quantità di substrato usato per il saggio è significativamente più di 500-600 g
s.s. per contenitore, il numero di lombrichi deve esser aumentato in
proporzione.
È richiesto un normale equipaggiamento di laboratorio, in particolare:
- bilance in grado di pesare singoli lombrichi e suolo;
- pHmetro;
- apparato per determinare il contenuto in acqua nel substrato (per esempio
contenitore per essiccare);
- registratore di temperatura;
- misuratore di luce;
- equipaggiamento per miscelare o applicare;
- incubatrice o camera climatizzata.
Preparazione del suolo artificiale
Come bianco, viene utilizzato un suolo artificiale preparato secondo le Linee
Guida 207 dell’OECD e costituito dai seguenti componenti (basati sulla massa
secca):
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